津田芜菁黄烷酮-3-羟化酶基因启动子的克隆及其活性验证

来源 :第八届中国林业青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lurenjia1983
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以津田芜菁的DNA为模板,根据已经公布的Brassica rapasubsp.pekinensis中含有F3H基因的KBrS001M03克隆序列,采用常规PCR的方法,克隆得到津田芜菁F3H基因启动子区序列。在线比对和生物信息学分析表明此序列是位于津田芜菁F3H基因上游的启动子区序列,具有启动子特征,同时具有一部分与光反应有关的顺式作用元件。利用Gateway技术将该片段构建到驱动Gus基因的双元表达载体中,并采用农杆菌介导的真空渗透法转化津田芜菁无菌苗的离体胚轴和子叶,2天后对其进行Gus活性的组织化学染色。检测结果显示,胚轴和子叶中均有Gus基因表达。而且无论是在光下还是在黑暗中,克隆到的F3H启动子区序列均可驱动Gus基因正常表达。表明所克隆的序列具有启动子活性。
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