小鼠胚胎干细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞过程导致Kcnq1、Cdkn1c基因印记改变

来源 :中华医学会第九次全国内分泌学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:VBlover
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  目的 观察印记基因Kcnq1、Cdkn1c在小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为胰岛样细胞过程中表达情况,探讨体外诱导培养对胚胎干细胞基因组印记的影响。方法 体外诱导胚胎干细胞向胰岛样细胞分化,RT-PCR和细胞免疫荧光检测胰岛细胞标志基因表达;聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分别检测印记基因Kcnq1、Cdkn1c在诱导分化各阶段细胞中的亲本表达情况。结果 我们成功将胚胎干细胞诱导分化为胰岛样细胞。逆转录聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(RT-PCR/RFLP)检测分析显示,体外诱导分化后的细胞的印记基因Kcnq1、Cdkn1c呈双等位基因表达。结论 体外诱导培养可导致胚胎干细胞印记基因表达的改变,出现印记丢失。
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