PEDV、TGEV、PDCoV和GAR多重RT-PCR检测方法的建立及应用

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为了建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪A群轮状病毒(GAR)的多重RT-PCR实验室检测方法。参照GenBank中登录的PEDV、TGEV和PDCoV N基因和GAR VP7基因的保守序列,设计4对特异性引物,通过优化扩增程序和反应体系,建立检测这4种病毒的多重RT-PCR方法。结果表明,该方法对PEDV、TGEV、PDCoV和GAR有特异性扩增;4种重组质粒最低检测量分别为8.7、9.8、1 250、12.1拷贝/μL。对江西省部分地区猪场的30份腹泻猪的肠道样品和粪便样品进行检测,发现PEDV、TGEV和GAR的检出率分别为66.7%、3.3%、6.7%;其中检出PEDV、TGEV和GAR混合感染1份,PEDV和GAR混合感染2份。该检测方法特异性强,重复性与敏感性高。
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