小鼠单侧输尿管梗阻模型肾损伤随时间变化的研究

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目的

建立小鼠单侧(左侧)输尿管梗阻(UUO)模型,探究肾损伤随时间的变化情况和相关机制。

方法

50只小鼠随机分为两组:假手术组及UUO模型组(结扎左侧输尿管制成UUO模型),观察不同时间点两组生化指标、左肾重量/终末体重(LR/BW)、右肾重量/终末体重(RR/BW),并计算左肾重量/右肾重量比值(LR/RR)。采用HE、Masson及PAS染色法检测小鼠的肾脏病理学变化。免疫荧光染色观察小鼠肾小管周围毛细血管(PTC)缺失、肾实质细胞增殖(Ki67 细胞)以及巨噬细胞(CD68 标记)、成纤维细胞浸润及肾脏Wnt/β-catenin表达情况。

结果

UUO组小鼠体重在造模第3天迅速下降[(18.2±1.1)g vs (22.4±1.2)g],此后体重缓慢增加直至第28天,在第60天体重显著下降[(17.5±0.8)g];LR/RR和LR/BW在第3天显著上升,随后逐渐下降;第60天时肾功能明显恶化[血清肌酐(0.89±0.09)mg/dl,尿素氮(41.26±5.65)mg/dl];UUO组梗阻侧肾脏光镜显示肾小管间质纤维化和肾小球硬化,随着时间的推移,PTC缺失逐渐加重;巨噬细胞最初在左肾实质内显著增多,但在28 d后开始减少;成纤维细胞数量在梗阻侧(左侧)肾脏前14 d显著增多,此后下降至正常水平;UUO组非梗阻侧肾脏的细胞数量与假手术组差异无统计学意义;UUO组梗阻侧(左侧)Wnt/β-catenin免疫荧光强度在肾脏损伤后前14 d的表达显著上调,28 d后表达下降。

结论

UUO肾脏纤维化的发展涉及很多方面的变化,包括PTC缺失、巨噬细胞的浸润、成纤维细胞激活以及表达,但是这些变化随着时间而减弱。

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