【摘 要】
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为建立一种检测猪圆环病毒3型（PCV3）的PCR-ELSIA方法，根据GeneBank上报道的PCV3全基因组序列，针对其高度保守区域设计1对特异性引物，上下游引物的5’端分别标记生物素和地高辛。经PCR扩增获得大量带有标记的目的基因，依靠生物素-链霉亲和素的非共价结合作用固定目的基因于载体上，再通过羊抗DIG-HRP的显色反应，建立PCR-ELISA检测方法。结果表明，该方法与猪繁殖与呼吸综合征
【基金项目】
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河南省科技厅科技攻关项目（202102110094）； 新乡市科技攻关项目（GG2019018）；
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为建立一种检测猪圆环病毒3型（PCV3）的PCR-ELSIA方法，根据GeneBank上报道的PCV3全基因组序列，针对其高度保守区域设计1对特异性引物，上下游引物的5’端分别标记生物素和地高辛。经PCR扩增获得大量带有标记的目的基因，依靠生物素-链霉亲和素的非共价结合作用固定目的基因于载体上，再通过羊抗DIG-HRP的显色反应，建立PCR-ELISA检测方法。结果表明，该方法与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型无交叉反应，特异性良好。PCR-ELISA方法最低检测限为5.58×102 copies/μL，敏感性比常规PCR高100倍，常规PCR的检测限为5.58×104 copies/μL。PCR-ELISA方法批内和批间重复性检测的变异系数分别为1.90%～5.20%和3.89%～9.03%。对132份临床样品进行PCV3检测，PCR-ELSIA检出率为9.1%（12 /132），高于常规PCR的检出率（4.55%，6 /132）。综上，该方法具有特异、灵敏、安全高效的优点，可为PCV3的诊断、防控和流行病学调查提供新的技术手段。
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