【摘 要】
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SlPLL5已经被鉴定为一个PP2C,属于PP2C的C分枝。PP2Cs是目前所鉴定出的拥有最大群体的植物蛋白磷酸酶,在植物生长发育和信号调控等多个方面起到至关重要的作用。番茄是一种广泛种植的重要蔬菜作物,也作为模式作物在研究植物生长发育方面被广泛应用。因此研究SlPLL5在番茄生长发育中的作用对于我们更加精准地了解PP2C对番茄农艺性状影响具有重要的意义,对其他作物PP2Cs的研究也具有重要的参考
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（编号:31672142）；
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SlPLL5已经被鉴定为一个PP2C,属于PP2C的C分枝。PP2Cs是目前所鉴定出的拥有最大群体的植物蛋白磷酸酶,在植物生长发育和信号调控等多个方面起到至关重要的作用。番茄是一种广泛种植的重要蔬菜作物,也作为模式作物在研究植物生长发育方面被广泛应用。因此研究SlPLL5在番茄生长发育中的作用对于我们更加精准地了解PP2C对番茄农艺性状影响具有重要的意义,对其他作物PP2Cs的研究也具有重要的参考意义。本研究通过酵母双杂交发现SlPLL5和油菜素甾醇（BR）信号重要组分Sl BIN2存在互作,通过双分子荧光互补试验验证出SlPLL5和Sl BIN2在细胞膜上的互作。通过农杆菌介导的子叶转化法将SlPLL5在番茄中进行过表达,并且以表达量为高、中、低的三个过表达系为研究材料。ABA和BR具有拮抗作用,通过ABA处理后的种子萌发和根长试验来初步探究番茄SlPLL5对ABA信号的响应。对番茄苗期干旱处理来研究SlPLL5响应ABA信号对番茄耐旱性的影响。以番茄商业品种Moneymaker（MM）为对照,将三个SlPLL5转基因不同表达量的过表达系种植到试验田,对主要农艺性状进行调查,以此来研究SlPLL5过表达对番茄农艺性状的影响。本研究主要获得以下结果:（1）通过农杆菌介导的烟草瞬时转化法将GV3101::p BI121-35S-SlPLL5-GFP转入本氏烟草,利用荧光显微镜进行亚细胞定位观察,发现SlPLL5定位在细胞膜上,是一个膜定位的PP2C;将GV3101::p ER8-SlPLL5-Ce YFP和GV3101::p ER8-Ne YFP-Sl BIN2共同转入烟草叶片,利用激光共聚焦显微镜观察,发现SlPLL5和Sl BIN2在细胞膜上存在互作。（2）通过农杆菌介导的子叶转化法将GV3101::p BI121-35S-SlPLL5-GFP遗传转化番茄MM野生型中,获得了SlPLL5番茄过表达系,并且筛选出表达量差异比较大的三个系OE1、OE2、OE3。（3）以MM为对照,对OE1-OE3号系的种子进行ABA处理,发现OE1-OE3号系的种子萌发率和根长均显著小于MM;对OE1-OE3号系进行ABA响应基因的q PCR定量分析,发现OE1-OE3号系的ABA响应基因表达量相比MM均显著上调。这两个结果都初步说明了SlPLL5过表达增强了ABA信号。（4）以MM为对照,对OE1-OE3号系进行干旱处理,干旱处理5 d后OE1-OE3号系的植株萎蔫程度均显著小于MM,并且对干旱处理过程中的叶片相对含水量和MDA含量以及抗氧化物酶表达量进行分析,结果都表明OE1-OE3号系比MM更耐旱。（5）以MM为对照,对OE1-OE3号系的农艺性状进行测量分析,发现SlPLL5在番茄中过表达之后,叶片卷曲严重、叶面积减小、叶长宽比增大、光合作用减弱、果实成熟变晚,果实变小、产量降低、品质下降。
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