贵州观赏兰科植物病原真菌系统学研究

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兰科植物中许多种类具有重要的观赏价值,例如兰属、兜兰属、杓兰属等等。但随着人工栽培兰科植物面积的增大,病虫害也日趋严重,尤其是真菌病害方面,如蝴蝶兰煤烟病和茎基腐病、花梗腐烂病,炭疽病、叶斑病等等。所以,针对兰科植物真菌病害影响产业发展等问题,本研究对贵州由真菌引起观赏兰科植物的病害情况开展研究,获得以下研究结果:1.标本采集:先后在贵州省药用植物园、开阳南江大峡谷、贵州茂兰国家级自然保护区、江口县亚木沟、湄潭县、贵州省农业科学院园艺研究所、贵州省植物园等地进行样品采集到观赏兰科植物病叶样品156份,经镜检后共获得标本94份,经单孢分离和组织分离得到63个纯培养物;2.分子系统学分析:采用了分子系统学常用的β-tubulin2(TUB2),glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH),Actin(ACT),chitin synthase(CHS-1),和internal transcribed spacers(ITS)等基因,进行扩增、测序、比对等一系列操作,并下载具可信度高的序列,根据不同类群建立分子系统树,比对分析结果表明:63个培养物隶属于Colletotrichum,Curvicladiella,Daldinia,Physalospora,Periconia和Pestalotiopsis等11个属。3.物种鉴定:所分离到的菌株中,经过形态学和分子系统学分析,鉴定出8个新种,其中3个新种属于Colletotrichum,另外的分别是Curvicladiella Paphiopedili,Chaetopsina sp.,Chaetothyrina sp.,Paraphoma sp.及Pyrenochaetopsis sp..4.致病性实验:根据科赫法则,选择52个菌株分别在相应的寄主上进行了回接,有15株发病。重新分离得到3株是接种病原,其中1个菌株(Curvicladiella Paphiopedili,新种)引起兜兰枯萎病,1个菌株(Colletotrichum sp.,新种)引发春兰病害,另外1株(Nemania,待鉴定种)引起大花羊耳蒜病害,但只有分子数据,没有获得产孢结构等形态特征。
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