两种重要兽药残留物胶体金试纸条的研制及工艺的优化

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目的:建立并优化盐酸克伦特罗(CL)胶体金试纸条制备的各项工艺,研制可商业化生产的盐酸克伦特罗胶体金试纸条,建立稳定的胶体金试纸条产品研发平台;在此平台基础上研制呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(AHD)的胶体金试纸条,用于肉中呋喃妥因及其代谢物残留的监控。方法:从制金、标记、封闭等方面优化胶体金试纸条的整个工艺,初步研制了可商业化生产的检测CL的试纸条。在前面优化的基础上,用柠檬酸三钠还原法制备胶体金;用硫酸铵沉淀法纯化的抗1-氨基乙内酰脲的衍生物(CPAHD)单抗标记;利用对醛基苯甲酸(4-CBA)将1-氨基乙内酰脲(AHD)衍生成CRAHD,再用活性酯法将CPAHD与牛血清白蛋白(BSA)交联制备完全抗原。对制备的试纸条进行敏感性、特异性、稳定性和可靠性测定,初步制备了检测AHD的试纸条。结果:成功合成检测抗原CL-BSA和CPAHD-BSA:制备了颗粒大小均一的胶体金;优化了胶体金试纸条的整个工艺,研制了可商业化生产的检测CL的试纸条。研制了检测AHD的胶体金试纸条,3分钟内即可用肉眼观察到结果;最低检测限是2.33 ng mL-1;除了跟原药呋喃妥因有弱交叉反应外,与其它类似物均无交叉反应;室温下保存28周不失效;胶体金试纸条的检测结果跟ELISA呈现了很好的相关性。结论:本研究优化了胶体金试纸条的整个工艺,研制了可商业化生产的的检测CL的试纸条。研制了操作便捷、稳定可靠、灵敏度高的检测AHD的试纸条。
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