生物法合成右旋糖酐及表征

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右旋糖酐是一种由微生物以蔗糖为底物生成的胞外多糖,各种分子量的右旋糖酐产品可广泛用于医药、食品、化妆品等多个行业和领域。本文利用肠膜明串珠菌和圆弧青霉菌发酵法合成不同分子量的右旋糖酐,可为右旋糖酐工业的发展和蔗糖的深加工提供基础数据。建立了高效凝胶渗透色谱测定右旋糖酐分子量和液相色谱法测定合成体系中蔗糖、果糖和葡萄糖的方法。肠膜明串珠菌合成的右旋糖酐分子量巨大,估算超过2000k Da。用乙醇沉析法从肠膜明串珠菌合成培养液中沉析右旋糖酐,当乙醇浓度达到65%时,可将产物右旋糖酐完全沉析出来,乙醇沉析法可用于测定合成过程右旋糖酐的生成量。获得肠膜明串珠菌合成右旋糖酐培养基的优化组成为,蔗糖140.0g/L、蛋白胨7.7g/L、混合磷酸盐1.5g/L、营养因子0.7g/L。在选定的转化条件下,转化30小时右旋糖酐的产率达到96.03%,生成速率为2.12g·L-1·h-1。研究了圆弧青霉菌产酶降解右旋糖酐过程,当右旋糖酐浓度为9.0%,初始p H为6.0,培养温度50℃,原料液与酶液比为1:1,摇床转速为150r/min,反应48小时,可将分子量超过2000k Da的右旋糖酐降解为重均分子量为10000Da左右的右旋糖酐。降解产物分子量分布宽度指数2.45,可通过反应时间调控降解产物的分子量。红外光谱和核磁共振分析表明,肠膜明串珠菌合成的右旋糖酐产物与圆弧青霉菌酶液降解右旋糖酐产物均为α-型右旋糖酐,主要由α-1,6糖苷键组成的直链结构,含有少量的由α-1,3糖酐键连接结构。
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