【摘 要】
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表面等离子体共振(SPR)1 能实时监控和分析在传感芯片表面固定的靶标分子与分析物之间的结合情况,可将芯片表面与靶标分子结合的分析物进行解离-再生回收.将核酸文库流经固定了筛选靶标分子SPR 传感芯片表面,这样能实时观测并记录文库与靶标分子之间的结合情况,而且能够将靶标-适配体复合物与未结合的文库进行分离,然后再将芯片表面与靶标结合的适配体通过仪器再生步骤进行回收2.SPR-SELEX 过程是通过
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表面等离子体共振(SPR)1 能实时监控和分析在传感芯片表面固定的靶标分子与分析物之间的结合情况,可将芯片表面与靶标分子结合的分析物进行解离-再生回收.将核酸文库流经固定了筛选靶标分子SPR 传感芯片表面,这样能实时观测并记录文库与靶标分子之间的结合情况,而且能够将靶标-适配体复合物与未结合的文库进行分离,然后再将芯片表面与靶标结合的适配体通过仪器再生步骤进行回收2.SPR-SELEX 过程是通过在芯片多个通道表面固定同一种筛选靶标分子,应用该方法进行适配体筛选,能高效得到与靶标结合的适配体.但该方法没有进行负筛过程,SPR-SELEX 筛选出的适配体产物可能出现,在含有与靶标分子来源相同的共存物质存在时,所筛选的适配体无法特异性识别靶标分子,可能引起交叉反应.将正、负筛结合时,能提高所筛选适配体体对靶标的亲和力与特异性.将表面等离子体共振成像技术与微流控结合,能实现实时评估筛选文库与靶标分子之间的结合情况,同时进行负筛-正筛步骤,增加所筛选出的适配体对靶标识别的特异性与亲和力.金属纳米材料的局域等离子体(LSPR)能与SPR 芯片表面产生的表面等离子体(SPPs)进行耦合,能够增强SPR 对分析物的检测灵敏度.相比纳米金,纳米银3 具有更强的耦合作用,对于传感信号具有更好的增强效果.我们建立了一种基于纳米银信号放大、实时、高通量的SPR-imaging 核酸适配体筛选方法.通过在正筛通道内固定筛选靶标(乳铁蛋白Lactoferrin),在负筛通道内固定与靶标分子同一来源的三种蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、酪蛋白)及BSA.将十面体的纳米银表面通过巯基自组装能与文库反向引物杂交的核酸链,将筛选文库与纳米银表面的核酸杂交,进行实时SELEX 操作.使用该方法,进行5 轮筛选后,共筛选出了5 条对乳铁蛋白具有特异性识别的核酸适配体.
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