利用RNAi手段对智利小植绥螨生殖相关基因的初步探究

来源 :中国植物保护学会2018年学术年会暨植保科技奖颁奖大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cicihaicic
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  智利小植绥螨作为植绥螨科最重要的生物防治种类之一,有着特殊的生殖方式,其所有后代须经交配产生,雌性为二倍体,雄性因来自父本的基因组丢失成为单倍体,又被称为假产雄孤雌生殖。过去的研究多集中在生态学或进化遗传学等领域,分子生物学方面研究较少,生殖机制仍模糊不清。目前笔者实验室完成了对智利小植绥螨基因组序列的初步组装,在此基础上,笔者以果蝇和西方静走螨作为参照,根据序列保守性分析,选择了3个与生殖相关的基因(RpL11、RpS2、tra-2),用RNAi饲喂法对基因功能展开初步探究,用qRT-PCR方法确定目的基因有没有被成功敲除或者表达量降低。试验结果表明:饲喂靶标基因dsRNA后,RpL11、RpS2、tra-2基因被成功干扰,表达量与对照相比分别降低了42%、72%、59%。当RpL11和RpS2被干扰后,智利小植绥螨的产卵量与对照相比显著降低,日均产卵量减少了70%左右,多数处理仅产少量卵甚至不产卵。后代雌性比和卵的孵化率也略有下降,部分卵发生变形且无法孵化。当tra-2被干扰后,智利小植绥螨的产卵量和后代雌性比没有受到明显影响,但卵的孵化率显著降低,大约减少了50%左右,多数雌螨在整个产卵期中所产的卵均发生严重变形,无幼螨孵出。笔者发现,RpL11和RpS2基因可能在智利小植绥螨的繁殖中起着关键作用,tra-2基因可能在智利小植绥螨卵的发育中起着关键作用。
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