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[期刊论文] 作者:万莹铚,李秋霞,张宏岐,邹坤,肖萌,伍业旭,张松,邓锐, 来源:中国生物制品学杂志 年份:2022
目的 探讨酵母抽提物(yeast extract,YE)FM888对CHO细胞生长的影响。方法 以CHO悬浮细胞为研究对象,在EmCD CHO?...用添加1、2 g/L FM888的EmCD CHO?Medium培养基培养CHO细胞,生化分析仪检测细胞的生化代谢(葡萄糖...
[期刊论文] 作者:张燕娜, 章郭真, 李刚, 来源:生物化工 年份:2022
目的:本实验在摇瓶和3 L生物反应器内分别研究抗结团剂(Anti-Clumping Agent,ACA)对CHO-S和CHO-K1细胞种子链阶段和流加培养阶段细胞生长和代谢、蛋白表达以及关键质量的影响。...方法:使用CHO-S和CHO-K1细胞在摇瓶和3 L生物反应器进行种子链扩增和流加培养,两个细胞在两个阶段均设计添加ACA的实验组和不添加ACA的对照组,以观察细胞结团情况,检测细胞生长密度及活率,...
[期刊论文] 作者:林健芬,罗顺, 来源:中国生物工程杂志 年份:2022
近些年来,治疗性重组蛋白类药物是生物制药领域研究的热点.工业化生产中常用于重组蛋白表达的细胞系是中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞.传统CHO细胞系的表达大多数基于随机整合的方式...,这可能会使目标基因整合到异染色质区域或者不稳定的染色质区域,导致CHO细胞表达不稳定,需要多轮筛选才能获得理想的表达细胞系.最新研究表明,外源基因在CHO细胞预测/特定的基因组位点中进行特异性整合,可以使重组...CHO细胞的表达保持长期一致性和稳定性.CHO细胞基因组中高效稳定的转录整合位点被称为...
[期刊论文] 作者:任自强, 王梦灿, 张海灵, 朱希强, 林剑, 来源:中国生物工程杂志 年份:2022
中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells, CHO)表达系统因具有较高密度培养、高表达和相对完整的蛋白质糖基化修饰系统等特点,成为生产糖蛋白广泛应用的宿主表达细胞之一。...目前已产生不同的CHO细胞系和各种功能细胞株以满足对糖蛋白的大量生产和其他实验需求。近年来,随着基因工程、蛋白质工程、细胞工程和发酵调控等技术的发展应用,由CHO细胞生产糖蛋白的产量和糖基化修饰程度取...
[期刊论文] 作者:, 来源:中国生物工程杂志 年份:2022
工业化生产中常用于重组蛋白表达的细胞系是中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞。...传统CHO细胞系的表达大多数基于随机整合的方式,这可能会使目标基因整合到异染色质区域或者不稳定的染色质区域,导致CHO细胞表达不稳定,需要多轮筛选才能获得理想的表达细胞系。...最新研究表明,外源基因在CHO细胞预测/特定的基因组位点中...
[期刊论文] 作者:于浩洋,仇松寅,王彩霞,林祥梅,贾红,李昊轩,刘晓飞,冯春燕,吴绍强, 来源:中国兽医科学 年份:2022
谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)是合成CHO细胞生长所需要的谷氨酰胺的关键酶。...为了获得能快速稳定表达外源蛋白的CHO细胞GS筛选系统,根据CRISPR/Cas9技术原理,针对GS基因设计3对sg RNA,分别将连接sg RNA的pX459质粒转染至CHO-K1细胞中以便定向敲除GS...基因;经筛选后利用PCR及测序分析鉴定GS基因敲除情况;将GS基因敲除的CHO细胞株(...
[期刊论文] 作者:冯莹莹,肖梦珂,路江涛,王小引,柴玉荣,王天云,贾岩龙, 来源:生物工程学报 年份:2022
中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞是生产复杂重组药物蛋白的首选宿主细胞,腺嘌呤磷酸核糖转移酶(adenine phosphoribosyltransferase,...采用基因编辑技术敲除CHO细胞中aprt基因,验证获得的APRT缺陷型CHO细胞系的生物学特性;构建两种真核表达载体:...
[期刊论文] 作者:孙瑾瑜, 刘光, 李晨, 王颖, 刘国庆, 来源:中国生物工程杂志 年份:2022
中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells, CHO)是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。...随机整合(random integration, RI)工艺是目前构建重组CHO细胞株的主要策略,由于CHO细胞基因组缺乏稳定性,为得到产量高、品质好且适应特定工艺的细胞株,通常需要1~2轮高通量筛选,...
[期刊论文] 作者:牛宇辉,李向茸,吴贝,李洪珊,李殿玉,陈磊,魏锁成,冯若飞, 来源:生物技术通报 年份:2022
目前,悬浮CHO细胞作为外源蛋白的最有潜力的工程细胞株被广泛应用,探索其高密度生长和高表达外源蛋白的培养条件也成为研究的热点。...葡萄糖和丁酸钠在促进CHO细胞生长和外源蛋白表达方面具有重要作用,所以研究葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞表达重组人血清白蛋白的影响有重要的应用价值。...首先利用单因素试验确定了葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞表达重组人血清白蛋白的作用,并筛选出最优添加条件;然...
[期刊论文] 作者:谢秋玲, 谭楚敏, 王亚玉, 陈子鑫, 熊盛, 来源:华南理工大学学报(自然科学版 年份:2022
为给细胞株基因工程改造提供背景条件,文中以TNFR-Fc为模式蛋白,比较两株不同来源的CHO-DG44细胞在生长代谢以及外源蛋白TNFR-Fc表达方面的差异,采用i TRAQ结合2D LC-MS/MS技术...,比较CHO-DG44(A)/TNFR-Fc和CHO-DG44(B)/TNFR-Fc细胞株的蛋白表达谱,并对差异蛋白进行了蛋白类型分析、差异基因GO富集分析和差异基因KEGG富集分析。...
[期刊论文] 作者:张毅,王陈,石晶晶,陈学军,张瑞华,靳倩,石童,李丽琴, 来源:中国生物工程杂志 年份:2022
目的:构建α1亚基诱导表达、β2和γ2L亚基稳定表达的人源α1β2γ2L-GABAAR-CHO(Chinese hamster ovary)细胞株.方法:从人cDNA文库中扩增α1、β2、γ2L亚基编码基因...,分别构建亚基表达载体;将三个亚基表达载体共转染CHO-K1细胞,通过抗性筛选、膜电位检测法进行稳定表达克隆筛选;通过qPCR、Western blot对亚基表达进行鉴定;以激动剂GABA、阳性变构调节剂地西泮...
[学位论文] 作者:冯莹莹, 来源:新乡医学院 年份:2022
背景在生物制药工业中,中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞是重组药物蛋白生产应用最为广泛的哺乳动物细胞表达系统。...CHO细胞克隆之间转基因表达水平的差异,导致重组蛋白表达的不稳定性(异质性)成为突出的问题。...
[期刊论文] 作者:袁红,白兴文,李坤,李平花,孙普,宋雅丽,焦云娟,刘在新,卢曾军,李冬,包慧芳, 来源:中国兽医科学 年份:2022
为了探究猪源IFN-λ3蛋白能否在CHO-S悬浮细胞中表达以及表达蛋白的抗口蹄疫病毒(FMDV)活性,根据NCBI上的猪源IFN-λ3序列,构建真核表达载体pcDNA3.4-IFNλ3-His,将其转染至...CHO-K1贴壁细胞中,用间接免疫荧光试验和Western-blot验证重组质粒是否表达IFN-λ3蛋白.将pcDNA3.4-IFNλ3-His转染至CHO-S悬浮细胞中大量制备IFN-λ3蛋白,用AKTA...
[期刊论文] 作者:宋兰兰,叶星,南建军,郭岚,徐玺丰,张祺,陈继军, 来源:微生物学免疫学进展 年份:2022
目的 摸索适合抗破伤风毒素抗体重组CHO工程细胞株生长和抗体蛋白表达的降温温度,为细胞培养工艺的建立提供参考。...方法 在体积为125 mL的培养瓶中,按50万个/mL的初始密度接种CHO工程细胞种子,采用补料分批培养模式,在转速125r/min,CO2浓度5.0%,湿度80%的温控培养摇床中进行细胞培养。...
[期刊论文] 作者:彭婷, 梅文枫, 来源:中国生物制品学杂志 年份:2022
CHO细胞可进行正确的翻译后修饰,如蛋白折叠、糖基化,且其表达的重组蛋白可分泌至胞外,更便于后续纯化,已成为抗体药物的首选表达宿主。...
[期刊论文] 作者:梁久佳,刘玉林,刘涵,俞露,张凯宁,刘景会,李利, 来源:中国生物制品学杂志 年份:2022
NewBrunSwick310 14 L生物反应器中培养表达重组人长效生长激素(recombinant human growth hor-mone Fc fusion protein,rhGH-Fc)的CHO...
[期刊论文] 作者:郑吉芬, 来源:医疗装备 年份:2022
目的 探讨卡前列素氨丁三醇注射液联合改良Cho缝合术治疗剖宫产术后出血产妇的临床效果.方法 选取2019年5月至2021年5月玉山县妇幼保健院收治的64例剖宫产术后出血产妇为研究对象,依据随机数字表法将产妇分为对照组和试验组...,各32例.对照组采用卡前列素氨丁三醇注射液联合B-Lynch子宫缝合术治疗,试验组采用卡前列素氨丁三醇注射液联合改良Cho缝合术治疗,比较两组治疗后30 min、2 h、6 h出血量以及治疗前和治疗后...
[期刊论文] 作者:蒋智勇,蔡汝健,李艳,郭怡德,楚品品,宋帅,勾红潮,李春玲, 来源:中国兽医科学 年份:2022
为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的间接ELISA检测方法,将构建的GFP基因与CD2v基因串联的重组真核表达质粒pIRES-GFP-CD2v转染CHO-K1细胞,通过嘌呤霉素筛选并结合有限稀释法,筛选稳定表达...CD2v的单细胞克隆株.转染细胞经过PCR鉴定后进行扩大培养,收集并纯化细胞培养液,获得目的蛋白,通过Western-blot验证其反应原性.结果表明,ASFV CD2v蛋白在CHO-K1细胞中被成功表达...
[期刊论文] 作者:刘骅,王花花,王珺,宫文武,丁震,孙备,许雷鸣,蒲江, 来源:中国药理学通报 年份:2022
目的 研究微量动态显色法用于重组新型冠状病毒疫苗(CHO细胞)中细菌内毒素定量检测的可行性。...
[期刊论文] 作者:王文静,薛雨佳,陈慧宇,姚楠,刘明, 来源:中国预防兽医学报 年份:2022
的重、轻链可变区基因及猫天然抗体(NAb)重、轻链恒定区基因,通过融合PCR获得鼠-猫重组重、轻链基因片段(CH/CL),构建嵌合抗体表达载体(pMC-CH、pMC-CL),并经菌落PCR鉴定正确后转染CHO-K1...
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