论文部分内容阅读
目的 建立定量检测幽门螺杆菌（Hp）细胞毒素相关蛋白基因A（cagA）的方法。方法 以含Hp cagA片段的质粒（pMC3）作为外参照品，在微孔板中对聚合酶链反应（PCR）扩增cagA的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交及酶促显色以定量检测cagA阳性Hp。结果 当PCR反应体系中原始模板为1～105拷贝，循环次数小于或等于25时，原始模板以相对固定的指数形式增加，在该范围内适宜定量分析。通过对20份已知Hp菌株cagA的检测，符合率达100％，观察结果的敏感度较电泳法提高了200倍。定量检测不同胃黏膜组织中cagA阳性Hp，检出底线为6拷贝/毫克组织。结论 本方法特异性强，敏感度高，对研究Hp与消化道疾病的关系及建立定量检测其他微生物的方法均有实用价值。