牛乳中白色念珠菌和近平滑念珠菌双重定量PCR检测方法的建立

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为建立生牛乳中白色念珠菌和近平滑念珠菌的快速检测方法,根据GenBank已公布的基因序列分别设计2种念珠菌的种特异性引物,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法检测目标菌的基因组DNA,并进行特异性、敏感性和重复性试验,用该方法对含有目标菌的生牛乳样本进行检测。结果表明,该方法特异性强,与对照菌株光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌和烟曲霉等病原真菌无交叉反应;灵敏度高,对白色念珠菌和近平滑念珠菌的最低检出量均为10 CFU/mL;重复性好,T m值和Ct值变异系数分别在0.1%和2.5%之内。该方法
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