白桦开花抑制因子 BpFLC 与 BpSVP 酵母表达载体的构建及互作验证1)

来源 :东北林业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghuajngs
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为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理,利用PCR技术从白桦幼叶cD-NA中克隆出BpFLC和BpSVP基因序列,利用NdeⅠ和Eoc RⅠ限制性内切酶将BpFLC和BpSV P分别整合进酵母表达载体pGBKT7和pGADT7中。 pGBKT7-BpFLC及pGBKT7-BpSVP转化酵母Y2Hgold菌株显示无自激活与毒性作用。酵母Y2Hgold [ pGBKT7-BpFLC ×pGADT7-B pSVP]、Y2Hgold [ pGADT7-BpFLC ×pGBKT7-BpSVP]均可在QDO/A/X平板上生长,并显示蓝色,说明能激活报告基因HIS3、ADE2、AUR1-C 、MEL1,由此表明BpFLC与BpS-VP蛋白能够结合,存在互作关系。
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