二烯丙基硫化物对百草枯中毒大鼠的抗炎机制

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目的

探讨二烯丙基硫化物(DAS)对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的影响。

方法

将45只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(NS)、PQ中毒模型组及DAS治疗组,每组15只。将百草枯溶液(70 mg/kg )一次性灌胃制备中毒模型;对照组灌胃等量生理盐水。制模后分别经腹腔注射DAS 100 mg/kg(DAS治疗组)、等量生理盐水(模型组和对照组),定时每日1次,共14 d。各组分别于制模后3、7、14 d随机各组处死5只大鼠。根据不同时间将各组动物用3.6%水合氯醛腹腔注射麻醉,解剖胸腔暴露肺,行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液测定肺泡灌洗液中蛋白含量并分离培养肺泡巨噬细胞(AM);用免疫细胞化学方法测定AM中NF-κB的表达。

结果

①大鼠原代巨噬细胞的分离培养:采用差速贴壁的方法分离纯化肺泡巨噬细胞,30 min可以见到较多的巨噬细胞贴壁。②支气管肺泡灌洗液蛋白含量测定:NS组和PQ组比较,支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3 d(261.6±17.16)μg/mL vs. (673.4±151.9)μg/mL;7 d(265.6±18.37)μg/mL vs.(581.3±134.58)μg/mL;14 d(253.8±11.43)μg/mL vs.(589.07±33.85) μg/mL,均P<0.05。PQ组和DAS组比较支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3 d(673.4±151.9)μg/mL vs. (342.9±39.03)μg/mL;7 d(581.3±134.58)μg/mL vs.(383.7±7.37)μg/mL,P<0.05;14 d(589.07±33.85 )μg/mL vs.(282.9±15.59) μg/mL,P<0.05。③免疫细胞化学结果NS组和DAS组肺泡巨噬细胞质有极少量NF-κB p65阳性表达;PQ组细胞核中有较多NF-κB p65阳性表达;DAS治疗组中NF-κB p65阳性表达较模型组明显减少,吸光度积分值NS组与PQ组比较,PQ组与DAS组比较,差异均有统计学意义,P<0.05。

结论

DAS能下调PQ中毒大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB的达,减少支气管肺泡灌洗液中蛋白量,故DAS具有一定抑制炎症介质释放,减少炎性渗出的作用。

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