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目的
探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于紫外线B(UVB)诱导晶状体上皮细胞(HLECs)凋亡的影响。
方法利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6转染到HLECs中，采用Western blot法测定细胞中KLF6蛋白的表达水平；采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞活力；经苏木精－伊红染色法观察细胞形态；采用Live/Dead染色法观察细胞受损情况；采用Western blot法检测细胞中凋亡标志物bax和bcl-2的相对表达量，并计算bax/bcl-2比值；采用细胞凋亡检测试剂盒定量测定细胞凋亡水平，并检测细胞中活性氧簇(ROS)的表达水平。
结果0.5 μg转染组和1.0 μg转染组细胞生存力较空载体对照组下降，差异均有统计学意义(均P<0.05)。KLF6高表达组细胞稀疏，细胞形态狭长，细胞质浓缩。正常对照组细胞形态稳定，数量均匀，为绿色活细胞；KLF6高表达组红色死亡细胞数量显著增多。UVB照射后，KLF6高表达组HLECs细胞凋亡值、bax相对表达量、bax/bcl-2比值、ROS表达量均高于空载体对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论高表达的KLF6通过调控凋亡相关蛋白的表达及促进内质网内ROS堆积来加剧UVB照射导致的HLECs凋亡，提示KLF6参与HLECs的凋亡调控。通过生物学手段特异性下调KLF6的表达有可能在一定程度上发挥对HLECs的保护作用。