限制性内切酶介导的玫烟色拟青霉原生质转化体系构建

来源 :浙江大学学报(农业与生命科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ttjjww1129
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丝孢类害虫生防真菌的生态适应性和环境抗逆性决定着生防菌剂的田间适用性,兼具多个抗逆性状的菌株一般只能通过相关功能基N的遗传操作和定向选育而获得,但这类真菌遗传操作的可行方法目前相当有限,本文利用限制性内切酶介导插入法将含有草丁膦抗性标记的Bar基因的质粒pAN52-1N-Bar转入玫烟色拟青霉Pfr116菌株的原生质体中,转化效率约为6~13个转化子μg^-1质粒DNA.通过对Pfr116菌株突变转化子的基因组DNA进行PCR产物检测及基因组DNA单酶切片段的Southern杂交分析,证明Bar基因已整合
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