B7-1与GM-CSF双顺反子慢病毒转染骨髓基质细胞的研究

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目的研究B7-1和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)双基因共表达慢病毒载体是否可介导目的基因在人骨髓基质细胞(MSCs)有效表达。方法采用改良的磷酸钙沉淀法将包装质粒、包膜蛋白质粒和含目的基因的转移质粒共转染293T包装细胞,收集的病毒上清感染密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离培养的MSCs,用荧光显微镜和流式细胞术(FCM)分析转导细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR分析目的基因在转导细胞的表达。结果密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离培养第三代的MSCs,CD90表达阳性率达到93.62%,包
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