siRNA干扰Gadd45α表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞侵袭和迁移的影响

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目的

探讨靶向沉默生长抑制和DNA损伤诱导45蛋白α(Gadd45α)对皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞株A431侵袭和迁移的影响。

方法

采用实时荧光定量PCR、Western印迹检测A431和Colon16细胞Gadd45α基因和蛋白的表达,选取高表达Gadd45α的A431细胞株作为研究对象。将A431细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染Gadd45α-siRNA-1,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测干预后Gadd45α mRNA和蛋白的表达,Transwell小室法及细胞划痕法检测干预对A431细胞株侵袭及迁移能力的影响。

结果

A431细胞高表达Gadd45α基因和蛋白。干预后实验组A431细胞Gadd45α mRNA及蛋白相对表达量分别为0.286 ± 0.013、0.33 ± 0.007,明显低于阴性对照组组(1.028 ± 0.183、0.87 ± 0.002)以及空白对照组(1.001 ± 0.057、0.86 ± 0.004),差异均有统计学意义(F值分别为5 893.857、2 763.000,均P < 0.001)。实验组A431细胞株穿过聚碳酸酯膜的细胞数为66.33 ± 3.79,明显多于阴性对照组(26.00 ± 4.36)和空白对照组(28.33 ± 4.16),3组间差异有统计学意义(F= 20.084,P= 0.002)。划痕实验中,实验组每高倍视野下细胞迁移数为315.33 ± 6.66,明显多于阴性对照组(154.67 ± 2.08)和空白对照组(130.67 ± 3.51),3组间差异有统计学意义(F= 1 676.255,P < 0.001)。

结论

A431细胞株高表达Gadd45α,靶向沉默Gadd45α表达能增强A431细胞株的侵袭和迁移能力。

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