论文部分内容阅读
目的在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的第一,二结构域(DI/Ⅱ)并进行免疫反应性鉴定。方法登革Ⅱ型病毒接种乳鼠,提取总RNA,经RT-PCR扩增目的基因片段。双酶切PCR纯化产物和质粒pET-28a(+)并连接构建重组质粒pET28a-DV2-E-D1&2。筛选阳性菌落,提取质粒并转化感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白并进行SDS-PAGE分析,Westernblot鉴定。结果RT-PCR扩增得到约900bp的目的基因片段,双酶切及测序分析表明,插入序列正确且开放读码框正确。重组菌诱导后在3