【摘 要】
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背景:随着软骨组织工程技术的发展,国内外已有应用外周血源性间充质干细胞修复软骨缺损的体外培养及动物实验,并取得了不错的进展,转化生长因子β3常被用于细胞体外培养以诱导间充质干细胞成软骨分化.但在实验应用中,很少涉及转化生长因子β3量效探讨,涉及量效的细胞培养实验又经常误用单因素方差分析或t检验来分析这类资料.目的:采用重复测量方法分析转化生长因子β3诱导外周血源性间充质干细胞成软骨分化的量效关系,以期获得较佳的转化生长因子β3用量,获得较好的成软骨分化效果.方法:动员、提取、培养滇南小耳猪外周血源性间充质
【机 构】
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昆明医科大学第一附属医院,运动医学科,云南省昆明市 650032;昆明医科大学第一附属医院,康复科,云南省昆明市 650032
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背景:随着软骨组织工程技术的发展,国内外已有应用外周血源性间充质干细胞修复软骨缺损的体外培养及动物实验,并取得了不错的进展,转化生长因子β3常被用于细胞体外培养以诱导间充质干细胞成软骨分化.但在实验应用中,很少涉及转化生长因子β3量效探讨,涉及量效的细胞培养实验又经常误用单因素方差分析或t检验来分析这类资料.目的:采用重复测量方法分析转化生长因子β3诱导外周血源性间充质干细胞成软骨分化的量效关系,以期获得较佳的转化生长因子β3用量,获得较好的成软骨分化效果.方法:动员、提取、培养滇南小耳猪外周血源性间充质干细胞,分别加入含不同质量浓度转化生长因子β3(25-500μg/L)的成软骨诱导液进行成软骨诱导分化,对照组不作诱导处理,培养第2,4,6,8,10,12,14天,CCK-8法检测各组细胞增殖情况;培养第3,7,14,21天,收集各组细胞培养上清,ELISA法检测Ⅱ型胶原水平;培养第21天,进行甲苯胺蓝染色观察聚集蛋白聚糖表达;培养第21天,进行免疫细胞化学染色观察Ⅱ型胶原表达.结果 与结论:在25-500μg/L范围内,转化生长因子β3质量浓度在40μg/L时外周血源性间充质干细胞生长增殖能力最强,转化生长因子β3质量浓度在40,80μg/L时更容易促进外周血源性间充质干细胞成软骨分化.
其他文献
背景:高压氧治疗和Nogo-A/NgR-RhoA/ROCK信号通路的抑制有助于移植细胞的增殖、分化.目的:探讨高压氧联合携带miRNA沉默NgR基因的大鼠骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤修复的影响.方法:靶向NgR的miRNA重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞,RT-qPCR和Western blot检测转染后NgR的表达.80只SD大鼠,随机选取15只大鼠作为假手术组,其余65只大鼠构建脊髓损伤模型,将造模成功的60只大鼠随机分为脊髓损伤组、高压氧组、骨髓间充质干细胞组和高压氧+骨髓间充质干细胞组.骨髓
背景:造血干细胞采集效果受多种因素综合影响,而明确的影响因素尚无定论,需要不断探索有可能影响造血干细胞采集的危险因素.目的:探讨50例淋巴瘤患者外周血造血干细胞动员采集过程中相关因素对首次采集结果的影响,并探讨采集结果与移植后造血重建的关系.方法:入选2015年1月至2020年1月接受自体外周血造血干细胞移植的50例淋巴瘤患者,分析患者的年龄、分期、骨髓侵犯、复发、放疗、粒细胞集落刺激因子持续使用时间、化疗疗程等因素对造血干细胞首次采集结果的影响,并探讨采集结果与中性粒细胞和血小板植入的关系.结果 与结论
背景:老年缺血性心脏损伤患者自体干细胞移植治疗效果欠佳,需要探索提高老年干细胞修复再生能力的有效途径.目的:探讨低氧预处理老年人骨髓间充质干细胞条件培养基对心肌的保护作用,为改善老年患者自体干细胞移植疗效提供实验支持.方法:将青年人骨髓间充质干细胞置于常氧培养箱培养,老年人骨髓间充质干细胞分别置于常氧和低氧培养箱培养,收集条件培养基分为青年常氧培养基组、老年常氧培养基组和老年低氧培养基组.H9C2细胞用3种条件培养基在常氧培养箱中培养24 h后,加入300μmol/L过氧化氢继续培养30 min诱导氧化应
背景:用异体脱细胞神经支架联合骨髓间充质干细胞和富血小板凝胶治疗兔股神经损伤,目前报道较少,机制并不明确.目的:评估脱细胞神经支架联合骨髓间充质干细胞和富血小板凝胶移植治疗兔股神经损伤的效果.方法:将25只新西兰兔随机分为5组,分别为单纯断端吻合组、脱细胞神经桥接组、脱细胞神经联合富血小板凝胶组、脱细胞神经联合骨髓间充质干细胞组、脱细胞神经联合富血小板凝胶和骨髓间充质干细胞组,术后12周称量腓肠肌湿质量,然后进行神经组织病理学染色.结果 与结论:脱细胞神经联合富血小板凝胶和骨髓间充质干细胞组腓肠肌湿质量明
背景:如何改善损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进神经元和轴突修复与再生,是治疗脊髓损伤的难点.研究发现,硫酸软骨素酶ABC可通过介导硫酸软骨素蛋白聚糖的降解,增强轴突的再生和可塑性;同时骨髓间充质干细胞来源外泌体可通过抗凋亡、调节免疫反应、增强神经元再生能力等途径在脊髓损伤修复中发挥作用.目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体联合硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制.方法:用外泌体提取试剂盒提取骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测CD63、Al
背景:既往研究发现许旺细胞及骨髓间充质干细胞诱导的类许旺细胞可以促进外周神经损伤后轴突的再生及功能恢复,而由于许旺细胞来源有限而限制了其应用,而且类许旺细胞外基质用于周围神经损伤的治疗鲜有报道.目的:探讨类许旺细胞外基质是否有助于周围神经损伤后的神经修复.方法:提取SD大鼠许旺细胞和骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞诱导分化为类许旺细胞,并进行细胞鉴定和制备细胞外基质,在体外环境下将背根神经节神经元和背根神经节组织块接种于细胞外基质上,观察神经轴突生长情况.制备SD大鼠坐骨神经缺损模型,分别用自体神经、
背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明.目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用.方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞学方法检测第3代细胞CD29、CD44、CD45的表达,然后用miR-NC、miR-146a mimics和miR-146a inhibitor转染脂肪间充质干细胞并进行成骨诱导分化,成骨诱导第6天,采用碱性磷酸酶染色观察钙化程度,RT
背景:人骨髓间充质干细胞在体外培养传代过程中存在着细胞老化现象,但其机制尚不明确.乙醛脱氢酶3B1具有抗氧化应激的作用,且氧化应激是导致细胞衰老的重要因素之一.乙醛脱氢酶3B1的表达异常是否与人骨髓间充质干细胞衰老相关尚未见报道.目的:观察乙醛脱氢酶3B1在人骨髓间充质干细胞衰老过程的表达变化,为探讨干细胞的衰老机制提出新研究方向.方法:建立人骨髓间充质干细胞自然衰老模型并进行鉴定,Bisulfit甲基化检测衰老前后的乙醛脱氢酶3B1基因表达变化,采用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot检测
背景:长链非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miRNA)是两类参与调控细胞增殖、凋亡和迁移等生命活动的小分子非编码RNA,且lncRNA还可作为竞争性内源性RNA与miRNA靶向结合,调控miRNA靶基因的表达,在肿瘤的发生发展中起重要作用.LINC02532可靶向结合miR-129-5p和miR-490-5p促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,但对胰腺癌干细胞生物学行为的影响及作用机制还未知.目的:探讨LINC02532对胰腺癌干细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制.方法:①选取2017年1月至
背景:胚胎期的神经干细胞可向神经元和神经胶质细胞分化,而实际应用中希望神经干细胞更多地分化成神经元.因此,研究神经干细胞向神经元的定向分化机制至关重要.DNA拓扑异构酶Ⅱ是一类广泛存在于生物体内的核蛋白,在DNA复制、修复、转录、重组以及染色体分离等生命活动中发挥重要作用.目的:探讨神经干细胞及其向神经元定向分化过程中DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及意义.方法:从ICR小鼠(E12.5 d)大脑皮质中分离培养神经干细胞,将神经干细胞球消化成单细胞后,以5×108 L-1密度接种于用Matrigel铺底的培养皿上