EGF-ERK1/2-IL-8通路在胆道闭锁患儿Kasai术后胆管炎中的作用机制研究

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目的 明确白细胞介素8(IL-8)在胆道闭锁(BA)患儿中的表达水平及其与肝门空肠吻合术(Kasai术)后胆管炎间的关系,探索调控IL-8的上游信号通路.方法(1)纳入33例BA患儿(BA组,其中胆管炎组18例,无胆管炎组15例),6例胆道扩张患儿(胆道扩张组)以及36例体检健康婴幼儿(正常对照组).获取全部BA患儿和健康婴幼儿血清样本,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-8和表皮生长因子(EGF)表达水平.取6例BA和6例胆道扩张患儿肝组织标本,免疫组化染色检测磷酸化胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)活化情况.(2)体外培养人正常肝细胞L-02,给予磷酸盐缓冲液(PBS)和25、50、100μg/L EGF干预24 h,定量聚合酶链反应(qPCR)检测IL-8水平.细胞系HIBEpic、L-02、LX-2分别给予PBS和100μg/L EGF干预24 h,qPCR检测IL-8水平.L-02细胞经100μg/L EGF和(或)5 mmol/L的ERK通路抑制剂KO-947干预后,检测ERK1/2活化情况和IL-8表达水平.结果(1)BA组血清IL-8水平高于正常对照组,胆管炎组术前血清IL-8水平高于无胆管炎组(P<0.01).BA组血清EGF与IL-8水平呈正相关(rs=0.422,P0.05),L-02细胞IL-8表达升高(P<0.01).100μg/L的EGF还可诱导L-02细胞p-ERK1/2大量表达,添加KO-947干预可逆转上述改变.结论 BA患儿术前血清IL-8表达显著升高,与Kasai术后胆管炎关系密切,EGF可通过ERK1/2信号通路促进肝细胞IL-8表达升高.
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