【摘 要】
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目的 观察三结构域家族33(TRIM33)基因对人胃癌细胞SGC-7901增殖及迁移的影响及意义.方法 通过TCGA和TIMER数据库分析TRIM33在胃正常黏膜组织和胃癌组织中的表达及与临床病理特征、预后的关系.将人胃癌细胞SGC-7901分为阴性对照组(NC组)、对照组(空载体组)与转染组(si-TRIM33组),Western blotting检测TRIM33蛋白表达水平,确定TRIM33敲减细胞模型是否构建成功.将模型构建成功的细胞分为空载体组与si-TRIM33组,采用CCK-8与平板克隆形成实
【机 构】
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宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;宁夏医科大学总医院消化内科,银川 750004;宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;宁夏医科大学病理学系,银川 750004;宁夏医科大学总医院消化
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目的 观察三结构域家族33(TRIM33)基因对人胃癌细胞SGC-7901增殖及迁移的影响及意义.方法 通过TCGA和TIMER数据库分析TRIM33在胃正常黏膜组织和胃癌组织中的表达及与临床病理特征、预后的关系.将人胃癌细胞SGC-7901分为阴性对照组(NC组)、对照组(空载体组)与转染组(si-TRIM33组),Western blotting检测TRIM33蛋白表达水平,确定TRIM33敲减细胞模型是否构建成功.将模型构建成功的细胞分为空载体组与si-TRIM33组,采用CCK-8与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞迁移能力;采用Western blotting检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达;通过TIMER数据库分析TRIM33的表达与免疫细胞浸润的相关性.结果 TRIM33在胃癌组织中的表达水平明显高于胃正常黏膜组织,其表达与年龄、性别、肿瘤分期、淋巴结转移相关(P<0.05),预示胃癌患者预后不良.细胞实验结果显示,低表达TRIM33的SGC-7901细胞表现为增殖、迁移能力均增强,EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-Cadherin)表达下降,波形蛋白、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)表达水平上调(P<0.05);TIMER数据库分析结果显示,胃癌组织中TRIM33 mRNA表达水平与CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞的浸润呈明显正相关(P<0.05),与M2型巨噬细胞、CD8+T细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞基因标志物CD163、CXCL9、ITGAM、KIR3DL2的表达呈正相关(P<0.05).结论 下调TRIM33能够加速胃癌进展,且与预后不良相关,其机制可能与TRIM33通过调节免疫细胞浸润进而增强胃癌细胞的迁移特性有关.
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