人毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因cDNA文库的构建

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:safemon
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目的构建毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的消减cDNA文库.方法分别提取凝集性生长和非凝集性生长状态下毛乳头细胞中的总RNA,应用SMART cDNA合成技术和抑制性消减杂交技术分离毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的cDNA片段并建立消减cDNA文库;利用PCR对随机挑选的100个白色菌落进行插入片段的验证,对其中证实有插入片段的30个克隆进行cDNA斑点杂交验证.结果所构建的消减cDNA文库扩增后得到320个阳性克隆,随机挑选的100个阳性克隆中95%的均有长度在100~600 bp的插入片
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