电针预处理对脓毒症小鼠肠黏膜屏障功能保护作用及MLCK/MLC信号通路的调节作用

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目的观察电针足三里预处理对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症肠小鼠黏膜功能损伤的保护作用及其机制研究。方法40只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、电针组和非经非穴组,电针组小鼠选取足三里穴予以电针预处理,每日1次,每次30min,持续5d;第5天时采用腹腔注射LPS构建脓毒症肠黏膜损伤小鼠模型。通过HE法观察小鼠回肠组织病理学改变并评分;采用ELISA法检测小鼠血清中C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和结肠组织中白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平;Westernblot法测定结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α和闭合蛋白(Occludin)表达的水平;免疫荧光法检测胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)和连接蛋白-5(Claudin-5)在回肠组织的表达水平;RT-PCR法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、MLC、ZO-1、Claudin-5、Occludin在结肠组织中的含量。结果电针足三里预处理对LPS引起细胞排列紊乱与缺失、结构破坏、腺体变形等病理损伤有改善作用,且与模型组相比,电针预处理小鼠回肠组织病理评分明显较低(P<0.05);与模型组相比,电针预处理小鼠结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α的含量降低(P<0.05)。此外,电针预处理降低了小鼠血清中CRP和PCT含量(P<0.05),促进了小鼠结肠组织中Occludin蛋白、OccludinmRNA、Claudin-5mRNA、ZO-1mRNA的相对表达量(P<0.05),下调了小鼠结肠组织中MLCK和MLCmRNA相对表达量(P<0.05)。结论电针足三里预处理后可通过抑制炎症反应和MLCK/MLC信号通路上调紧密连接蛋白的表达,从而发挥对LPS诱导的脓毒症肠黏膜屏障功能损伤的保护作用。
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