赭纤虫RNA聚合酶Ⅱ锌指基因片段的表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源 :水生生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cfj4208

【摘要】

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以一种进化较为原始的单细胞真核生物日本赭纤虫(Blepharisma japonicum)大核基因组DNA为模板,PCR扩增得到了RNA聚合酶锌指基因片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p1-ZFbl,在大肠

【作者】

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宋莉柴宝峰王伟梁爱华

【机构】

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山西大学

【出处】

：

水生生物学报

【发表日期】

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2005年5期

【关键词】

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赭纤虫 RNA聚合酶Ⅱ 锌指多克隆抗体进化 Blepharisma japonicum RNA polymerase Ⅱ Zinc finger Pol

【基金项目】

：

国家自然科学基金，山西省留学回国人员科研项目

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以一种进化较为原始的单细胞真核生物日本赭纤虫(Blepharisma japonicum)大核基因组DNA为模板,PCR扩增得到了RNA聚合酶锌指基因片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p1-ZFbl,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDSPAGE和Western blot分析证明目的蛋白得到了可溶性融合表达.用纯化的蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.Western印迹和ELISA鉴定结果表明抗体特异性较高,效价高达1:15000.

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