【摘 要】
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目的 探究胃癌细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因引起的耐化疗药的作用,并探究人参皂苷在治疗因CLDN18-ARHGAP26融合突变基因表达引起的耐化疗药治疗过程中的抗肿瘤作用.方法 采用免疫磁珠抗体标记胃癌细胞系BGC-823的侧群(SP)细胞和非侧群(NSP)细胞,选出NSP细胞转染过表达CLDN18-ARHGAP26融合突变基因的慢病毒载体.用qPCR检测细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)mRNA水平的表达.用Wester
【机 构】
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蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科,蚌埠 233004
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目的 探究胃癌细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因引起的耐化疗药的作用,并探究人参皂苷在治疗因CLDN18-ARHGAP26融合突变基因表达引起的耐化疗药治疗过程中的抗肿瘤作用.方法 采用免疫磁珠抗体标记胃癌细胞系BGC-823的侧群(SP)细胞和非侧群(NSP)细胞,选出NSP细胞转染过表达CLDN18-ARHGAP26融合突变基因的慢病毒载体.用qPCR检测细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)mRNA水平的表达.用Western blot检测转染上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-Cadherin、Vimentin的表达.用CCK-8检测转染细胞对化疗药奥沙利铂的敏感性.用CCK-8检测人参皂苷对转染细胞耐药性的影响.人参皂苷处理转染细胞后Western blot检测转染细胞的钙黏蛋白E(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 qPCR检测显示转染过表达CLDN18-ARHGAP26融合突变基因慢病毒载体的NSP细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因表达高于未转染组,ABCG2 mRNA表达高于未转染组(P<0.001).Western bolt显示过表达CLDN18-ARHGAP26融合突变基因的NSP细胞中E-Cadherin蛋白表达低于未转染组(P<0.05),Vimentin蛋白表达高于未转染组(P<0.01),转染细胞对奥沙利铂的敏感性低于未转染组(P<0.05).人参皂苷和奥沙利铂同时处理转染细胞,细胞存活率低于单纯奥沙利铂处理(P<0.05).人参皂苷处理转染细胞后E-Cadherin蛋白表达高于未处理组(P<0.01),Vimentin蛋白表达低于未处理组(P<0.05).结论 人参皂苷能逆转胃癌细胞中CLDN18-ARHGAP26融合突变基因表达诱导的细胞EMT转化和奥沙利铂的耐药性.
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