【摘 要】
：
构建过表达抗禽流感病毒（H5N1）M1蛋白入胞单分子抗体（TAT-ScFv-mFc）的慢病毒载体,筛选获得稳定表达TAT-ScFv-mFc的HEK293T稳转细胞株。PCR扩增目的基因,将其插入质粒pLVX-mCMV-ZsGreen1-Puro中,构建pLVX-TAT-ScFv-mFc-ZsGreen1-Puro慢病毒过表达质粒,对重组质粒进行慢病毒包装后使用转染试剂复合物转染HEK293T细胞系
【基金项目】
：
吉林省重点研发计划资助项目（20200404113YY）； 吉林省技术攻关计划资助项目（20190304038YY）；
论文部分内容阅读
构建过表达抗禽流感病毒（H5N1）M1蛋白入胞单分子抗体（TAT-ScFv-mFc）的慢病毒载体,筛选获得稳定表达TAT-ScFv-mFc的HEK293T稳转细胞株。PCR扩增目的基因,将其插入质粒pLVX-mCMV-ZsGreen1-Puro中,构建pLVX-TAT-ScFv-mFc-ZsGreen1-Puro慢病毒过表达质粒,对重组质粒进行慢病毒包装后使用转染试剂复合物转染HEK293T细胞系,并使用嘌呤霉素（Puro）筛选阳性表达细胞,经过扩大培养及裂解后,以ProteinG纯化目的蛋白并对蛋白纯品进行鉴定。Western blot检测结果显示,成功获得了稳定表达TAT-ScFv-mFc的HEK293T细胞株。ELISA、SDS-PAGE、BCA结果显示成功获得预期目的蛋白2 mL（0.39 g/L）。结果表明,本研究成功建立了稳定表达抗H5N1病毒抗体的293T细胞系,为进一步研究TAT-ScFv-mFc的功能结构奠定了基础,也同时为真核表达系统的抗体制备研究提供了参考依据。
其他文献
高等职业教育集团化办学不仅顺应了经济社会发展趋势，也适应社会进步需求，更满足高职院校快速发展壮大的诉求。然而，在推进集团化办学的过程中，许多高等职业教育集团还面临着教育集团层面、政府层面以及企业行业层面的问题，制约了高等职业教育集团的进一步发展壮大。对此，基于规模经济理论视角，在教育集团层面，高等职业教育集团需要创新各项机制，加强质量管理，打造教育品牌，培育集团文化，推进产学研一体化；在政府层面，
对孩子的教育已经越来越受到家长的重视,甚至为了所谓的"不让孩子输在起跑线上",很多家长早早地从幼儿教育时期开始就给孩子施加了巨大的压力。学校和教师为了迎合家长的这一理念,便出现了幼儿教育"小学化"这一现象,即不顾幼儿的年龄特点和性格特点等,强行给他们灌输本不该在相应成长时期学习的东西,强迫他们做不符合成长过程和成长规律的事情。这样的做法是急功近利的,是揠苗助长的,只能起到相反的
职业教育集团正成为落实国家职业教育法、增强职业教育适应性、实现职业教育高质量发展的重要载体。面对职业教育集团艰难的发展历程，职业教育集团化办学还面临着办学各方利益诉求尚未有效实现、市场运作的独立身份尚未有效达成、组织架构治理效能尚未完全释放等诸多瓶颈与挑战，从职业教育集团化办学的基本特征出发，职业教育集团化办学亟待完善层级组织架构，开发特色品牌项目；完善内部运行机制，优化治理体系；重塑政府角色，优
职业教育集团是对职业教育办学体制、运行机制、人才培养的重要创新。在分析乌鲁木齐职业教育集团的构成、组织架构的基础上，对集团运行成效进行分析，发现内部制度、内涵建设和功能发挥上存在的问题，进而提出探索建立企业法人型集团，完善组织架构和制度，加大扶持政策供给以及推动职业教育信息化建设与融合应用等发展对策。
产业学院是以职教集团为平台，集政、企、校为一体，整合多方优势资源，推动职业教育产教融合深度发展，强化专业技能教育，打造复合型技能人才的学院。基于此，本文阐述了产业学院的产业基础及运行机制，明确了产业学院的建设任务，提出了建设产业学院的保障性措施，旨在实现深化职业教育，提高人才培养质量的目标。
为更加有效地聚集资源而提升职业院校办学水平，有必要推进职业教育集团实体化运行。但这一发展要求受制于我国现行法规政策方面的有关规定，因为现有职教集团绝大多数由职业院校牵头，不能注册成立独立法人单位，从而难以发挥职教集团的整体作用。可以重新设计职教集团的治理结构，将职教集团划分为指导层、领导层、执行层和基础层，着力将职教集团执行层面的职能机构和基础层面的产业学院实体化，在职教集团整体上不能成为独立法人
受益于移动互联网、物联网、云计算等智能信息技术的蓬勃发展,当前的商业环境已发生巨大变化,企业的市场战略和营销方式呈现出全新的面貌。无论对于营销实践者还是理论研究者,“顾客导向”都是识别、理解和满足顾客需求最核心的概念,如何制定和实施营销战略以更好地为顾客创造价值始终是营销战略领域的重要课题。区别于传统环境,数字环境和技术拓展了顾客导向的理论边界,并为其内涵注入了新的思考逻辑。在商业领域,已有一些实
本文通过对高职旅游专业产教融合的必要性和可行性及高职旅游教育特性进行梳理，结合高职旅游专业产教融合实践现状及产生的问题成因，基于职业教育生态理论和工作本位学习理论，提出构建“一个连接点、多元主体深度协同保障校企‘二元’育人、深化‘五个对接’”的高职旅游专业产教融合生态机制的建议：以学生为本位，提升教育教学质量效果；以工作本位学习理念为指导，完善实践教学体系；以能力、素养提升为目标，挖掘竞赛项目价值
党的十八大以来尤其是习总书记在中央深化改革委员会审议《国家职业教育改革实施方案》（后简称职教20条）讲话发布以来，党中央对新时代职业教育高质量发展做出了一系列新部署。2021年是我国“十四五”规划的开局年，是推动新时代职业教育高质量发展的启动年，也将成为我国职业教育发展史上具有里程碑意义的一年。