【摘 要】
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目的 研究miR496在胃癌细胞中的表达,以及与LYN激酶在胃癌细胞中相互作用的关系,探讨miR496对胃癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-496在胃癌细
【机 构】
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承德医学院附属医院胃肠外科,河北承德067000;承德医学院附属医院麻醉科
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目的 研究miR496在胃癌细胞中的表达,以及与LYN激酶在胃癌细胞中相互作用的关系,探讨miR496对胃癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-496在胃癌细胞株(BGC-823、SGC-790、AGS、MKN45和MKN28)和正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.用miR-496质粒转染miR-496低表达AGS细胞,同时设置阴性对照组和空白对照组,qPCR检测转染效率.采用克隆形成试验检测细胞增殖,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭.使用生物信息学软件targetscan筛选miR-496的靶基因LYN,qPCR检测转染miR-496对LYNmR-NA表达的影响,Western blot检测各组细胞中AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达.结果 与正常胃上皮细胞系GES-1相比,MiR-496在3种胃癌细胞系SGC-790、AGS和MKN45中下调,其中在AGS细胞中表达最低(P＜0.05).过表达MiR-496后抑制了 AGS细胞的增殖(P＜0.05),同时也抑制了 AGS细胞的迁移和侵袭(P＜0.05).生物信息学分析显示miR-496与LYN激酶(LYN)之间存在一个结合位点.MiR-496过表达可抑制AGS细胞中LYN的表达(P＜0.05),而LYN过表达阻断了 MiR-496对肿瘤细胞生长的抑制,以及miR-496诱导的AKT/mTOR信号通路的抑制(P＜0.05).结论 miR-496在胃癌细胞中低表达,其通过靶向胃癌细胞中LYN的表达和AKT/mTOR信号通路抑制胃癌细胞的增殖和迁移.
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