RNA干扰趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤M14细胞侵袭和迁移的影响

来源 :中华皮肤科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mdtuyen
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目的

探讨靶向沉默趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤细胞株M14侵袭和迁移能力的影响。

方法

采用Western印迹实验检测黑素瘤M14和A375细胞CXCR7蛋白的表达,选取高表达CXCR7蛋白的M14细胞作为研究对象。将M14细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染CXCR7-siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测CXCR7 mRNA和蛋白在M14细胞中的表达水平,Transwell小室法及细胞划痕法检测干扰前后细胞侵袭及迁移能力的变化。

结果

实验组M14细胞CXCR7 mRNA及蛋白相对表达量分别为0.412 ± 0.023、0.144 ± 0.005,明显低于阴性对照组(1.211 ± 0.117、1)以及空白对照组(1.000 ± 0.102、1.016 ± 0.004),差异均有统计学意义(F值分别为30.068、11 485.5,P值分别为0.001、0.000)。实验组M14细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(20.617 ± 1.503)个,明显少于阴性转染对照组[(42.000 ± 6.018)个]和空白对照组[(43.627 ± 2.152)个],3组间比较差异有统计学意义(F= 32.416,P= 0.001)。划痕实验中,实验组每高倍视野(× 200)下细胞迁移数为15.00 ± 1.10,明显少于阴性对照组(44.90 ± 2.20)和空白对照组(45.30 ± 2.30),3组间比较差异有统计学意义(F= 2 411.945,P= 0.000)。

结论

靶向沉默CXCR7能显著抑制黑素瘤M14细胞的侵袭和迁移,有望为皮肤黑素瘤提供潜在的治疗靶点。

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