miR-496在卵巢浆液性癌中的表达及与SIX1的靶向关系研究

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:johnathan126
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目的:检测卵巢浆液性癌中微小RNA-496(microRNA-496,miR-496)的表达,关注其表达意义及与同源异型蛋白SIX1(homologous heteroprotein SIX1,SIX1)的靶向关系.方法:选择75例卵巢浆液性癌作为观察组,选择75例卵巢浆液性囊腺瘤作为对照组,应用实时荧光定量PCR法检测2组中miR-496的表达,应用免疫组化法检测观察组中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和B 细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,BAX)的表达,应用Western blot检测观察组中SIX1的表达.选择人卵巢浆液性癌细胞系SKOV-3,设置空白对照组、miR-496转染组、miR-496和SIX1共转染组,采用双荧光素酶基因实验验证miR-496与靶基因SIX1的关系.结果:miR-496在观察组的表达量明显低于对照组(1.52± 0.36 vs.2.03± 0.25,t=7.56,P=0.001),miR-496的表达在不同肿瘤最大径(1.65±0.36 vs.1.42± 0.33,t=5.32,P=0.012)、病理分级(1.64±0.35 vs.1.43±0.40,t=5.11,P=0.010)、有无脉管累犯(1.60±0.44 vs.1.35±0.43,t=5.11,P=0.011)、是否双侧发生(1.61 ±0.36 vs.1.40±0.32,t=5.11,P=0.010)、有无淋巴结转移(1.62±0.42vs.1.35 ±0.41,t=5.66,P=0.008)和不同TNM 分期(1.70±0.37 vs.1.42±0.39,t=5.65,P=0.009)的分组中有统计学差异.miR-496与生存时间有关(x2=4.13,P=0.010),miR-496与PCNA(r=-0.54,P=0.0186)、miR-496与SIX1(r=-0.58,P=0.0130)均具有负相关性,miR-496与BAX(r=0.52,P=0.0110)具有正相关性.双荧光素酶基因实验显示,miR-496能引起转染pGL3-SIX1-WT的细胞系中荧光素酶活性明显降低.结论:卵巢浆液性癌中miR-496的表达下降,是促进肿瘤形成和进展的重要分子因素,检测miR-496对判断预后可能有一定价值.miR-496可能通过负向调节靶基因SIX1调控肿瘤细胞的增殖和凋亡.
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