使用一种新策略在大肠杆菌中高效表达hbFGF

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翻译起始区(TIR)的二级结构是影响翻译效率的决定性因素,同时密码子的偏好性问题也是个至关重要的方面.基于以上两点考虑,对hbFGF 5'末端35个碱基进行了改造,对其中4个位点进行了定点突变,另有4个位点进行了随机点突变.这些突变都可能造成TIR二级结构变化.这4个随机突变共有32种组合,使用RNA结构预测软件DNASIS v2.5对这32种序列分别模拟其二级结构且计算其自由能,并选取了10条自由能最高的序列.根据这10条序列,分别设计引物引入突变,克隆至表达载体pET-3c上,然后转化宿主菌E
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