【摘 要】
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目的：人源ACE2是SARS-CoV-2的细胞表面受体，构建ACE2原核表达载体并对其进行结构与功能的生物信息学析，探究其介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。方法：本文采用Protparam、ProtScale、NetPhos3. 1、SignaIP 4.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODEL和Blast等在线
【基金项目】
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山西省高等学校科技创新项目（No.2020L0749）； 山西医科大学汾阳学院引进人才启动金项目（No.2020A01）； 国家级大学生创新创业训练计划项目（No.202117114001）； 山西省高等学校大学生创新创业训练计划重点项目（No.S202117114008）；
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目的：人源ACE2是SARS-CoV-2的细胞表面受体，构建ACE2原核表达载体并对其进行结构与功能的生物信息学析，探究其介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。方法：本文采用Protparam、ProtScale、NetPhos3. 1、SignaIP 4.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODEL和Blast等在线软件和数据库对ACE2蛋白的理化性质、亚细胞定位、翻译后修饰及相互作用网络等生物学特性进行了系统分析，并利用Clustal X2和MEGA7.0软件对ACE2进行同源性分析和系统进化分析。最后，通过分子克隆技术构建重组表达载体pET-22b-ACE2并进行原核表达。结果：ACE2由805个氨基酸组成，呈酸性，分子量92.5 kDa，等电点5.36，有77个潜在的磷酸化位点和14个糖基化位点，是一种亲水性较强的跨膜蛋白。ACE2主要分布于宿主细胞的内质网膜、高尔基体和细胞膜，二级结构组成以α-螺旋为主。原核表达结果显示，ACE2主要在细菌裂解液离心之后的沉淀中表达，这为后续的结构分析和疫苗研发奠定了基础。多序列比对和进化分析显示，倭黑猩猩与智人亲缘关系最近。结论：本研究为ACE2蛋白的表达纯化、结构与功能研究提供了数据基础，有助于阐明ACE2介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。对SARS-CoV-2感染的治疗和跨物种传播提供新的见解，为研究广谱抗病毒药物、治疗SARS-CoV-2和其他致命冠状病毒株的有效分子靶点提供依据。
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