人外周血树突状细胞的诱导、鉴定及活性测定

来源 :中华细胞与干细胞杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:owennb1
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目的探讨人外周血来源单个核细胞诱导为树突状细胞(DC)的方法,并对诱导细胞进行活性测定。方法采用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,然后加入100ng/ml人粒-巨噬细胞集落刺激因子和30ng/ml人白细胞介素4培养5d,隔天半量换液,补充半量的细胞因子,于第5、6天,每孔加入1000U/ml肿瘤坏死因子,于培养第7天收集悬浮细胞。倒置显微镜每天观察细胞生长情况,用CD1a和CD83通过流式细胞仪和免疫荧光染色检测细胞表面表型,把DC与T细胞混合培养,按1:1、1:2、1:5的比例加入T淋巴细胞,MTT
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