【摘 要】
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探讨山药多糖（Chinese Yam polysaccharide，CYPS）协同核苷酸类似物（nucleoside analogues，NAs）抗乙型肝炎病毒（HBV）的分子机制。将不同浓度的山药多糖和恩替卡韦加入HepG2.2.15细胞中，采用CCK8法检测细胞毒性，筛选出2种药物抑制HepG2.2.15细胞的最佳浓度及时间，分为对照组、山药多糖组、恩替卡韦组和联合用药（山药多糖+恩替卡韦）组
【基金项目】
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医院肝病临床医学研究中心项目（2021yxky079）； 甘肃省消化系统重症疾病临床医学研究中心项目（20JR10RA017）；
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探讨山药多糖（Chinese Yam polysaccharide，CYPS）协同核苷酸类似物（nucleoside analogues，NAs）抗乙型肝炎病毒（HBV）的分子机制。将不同浓度的山药多糖和恩替卡韦加入HepG2.2.15细胞中，采用CCK8法检测细胞毒性，筛选出2种药物抑制HepG2.2.15细胞的最佳浓度及时间，分为对照组、山药多糖组、恩替卡韦组和联合用药（山药多糖+恩替卡韦）组，将药物加入HepG2.2.15细胞中，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组药物对细胞上清表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）和e抗原（hepatitis B virus e antigen，HBeAg）分泌量的影响，采用聚合酶链式反应（probe quantitative real-time PCR，probe qRT-PCR）检测药物对HepG2.2.15细胞HBV-DNA的影响，采用蛋白免疫印迹（Western blot）检测各组药物对HepG2.2.15细胞中p38MAPK、p-p38MAPK、Na+-牛磺胆酸共转运多肽(Na+-taurocholic cotransport polypeptide，NTCP)蛋白表达的影响。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）检测药物对HepG2.2.15细胞中p38MAPK、NTCP核酸表达的影响。结果显示，与对照组相比，山药多糖组、恩替卡韦组和联合用药组中HBeAg、HBsAg浓度均下降（P＜0.01或P＜0.001），均可抑制HepG2.2.15细胞HBV-DNA（P＜0.01），其中联合用药组抑制HepG2.2.15细胞的HBV-DNA更明显（P＜0.001），且p-p38MAPK、NTCP蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），p38MAPK mRNA表达水平上升，NTCP mRNA表达水平下降（P＜0.05或P＜0.01）。综上，山药多糖可通过p38MAPK信号通路降低NTCP蛋白和核酸的表达协同恩替卡韦抗HBV。
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