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目的
探讨表皮生长因子受体（EGFR）shRNA联合西罗莫司对人皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞增殖、凋亡的影响及机制。
方法Colo-16细胞分为5组：正常细胞组（常规培养 磷酸盐缓冲液）、阴性对照组（转染shRNA-NC质粒 磷酸盐缓冲液）、西罗莫司组（常规培养 西罗莫司）、EGFR shRNA组（转染EGFR shRNA质粒）、联合组（转染EGFR shRNA质粒 西罗莫司）。采用MTT法检测各组24 ~ 96 h各时间点细胞增殖活性，流式细胞仪分析处理48 h后各组细胞凋亡情况。RT-PCR检测Bcl-2、Bax mRNA的表达，Western印迹法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase3、cleaved caspase9、Bcl-2、Bax、细胞增殖相关蛋白p-mTOR、p-AKT、p-P70S6K及细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两多重比较采用SNK-q检验。
结果MTT检测显示，24 ~ 96 h西罗莫司组、EGFR shRNA组及联合组Colo-16细胞增殖活性均显著低于正常细胞组（均P