【摘 要】
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目的:明确普列克底物蛋白同源样结构域家族A成员1蛋白(PHLDA1)在各胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞生物学特性的影响。方法:先采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测MGC-803、B
【机 构】
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江苏大学医学院,安徽医科大学第一附属医院生殖中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81772157);江苏省高等学校自然科学研究重大项目(17KJA320001)
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目的:明确普列克底物蛋白同源样结构域家族A成员1蛋白(PHLDA1)在各胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞生物学特性的影响。方法:先采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测MGC-803、BGC-823、MKN45、SGC-7901和HGC-27共5种胃癌细胞系中PHLDA1蛋白和mRNA的表达;再将MGC-803细胞分为对照组(转染乱序RNA)和干扰组(转染靶向干扰PHLDA1的siRNA),蛋白质印迹法检测2组细胞中PHLDA1蛋白的表达;CCK8实验检测细胞增殖率;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;蛋白质印迹检测各组细胞中Bax、Caspase-8、Cleaved-caspase-8、Caspase-3、Cleaved-caspase-3、Caspase-9和Cleaved-caspase-9凋亡相关蛋白的表达。结果:PHLDA1在5种胃癌细胞中呈不同程度高表达,在MGC-803细胞中表达量最高;与对照组比较,干扰组PHLDA1表达量显著降低(P<0.01),细胞增殖率明显减慢,克隆形成数显著减少、单个克隆的细胞数明显减少(P均<0.05),Cleaved-caspase-8、Cleavedd-caspasee-3、Caspase-9和Cleaved-caspase-9蛋白表达明显升高(P均<0.05)。结论:PHLDA1在胃癌细胞系中呈高表达,沉默其表达可抑制胃癌细胞增殖。
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