新基因MAGE-n表位肽与人HSP70融合基因的构建及表达纯化

来源 :中国医药生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：w_zhou

【摘要】

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目的构建MAGE-n159-167（QLVFGIEVV）表位肽与人热休克蛋白70（HSP70）的融合基因并表达纯化。方法应用PCR方法,将QLVFGIEVV的cDNA序列融合到人HSP70基因的3＇端,将融合基因克隆入原核

【作者】

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张秀敏史琪琪李增山叶菁王军伟林慧曲萍胡沛臻隋

【机构】

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第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室/肿瘤生物学国家重点实验室,第四军医大学教学实验中心

【出处】

：

中国医药生物技术

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

HSP70热休克蛋白类基因融合癌症疫苗 MAGE-N 表位肽原核表达 Hsp70 Heat-Shock Proteins Gene fusion Canc

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863计划）（2007AA02Z470）, 国家自然科学基金（30901735）, 陕西省攻关项目[2007K09-05（2）]通讯作者：隋延仿,Email：suiyanf@fmmu.edu.cn

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目的构建MAGE-n159-167（QLVFGIEVV）表位肽与人热休克蛋白70（HSP70）的融合基因并表达纯化。方法应用PCR方法,将QLVFGIEVV的cDNA序列融合到人HSP70基因的3＇端,将融合基因克隆入原核表达载体pET-28a（＋）中,构建重组质粒pET-28a（＋）QLVFGIEVV-HSP70;采用双酶切（Sac Ⅰ、Hind Ⅲ）及PCR鉴定后测序;转化大肠杆菌E.coli BL21（DE3）,用IPTG诱导表达,Ni Sepharose6FF亲和填料进行分离纯化,SDS-PAGE

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