目前，在转基因作物中使用的启动子往往都是组成型启动子，如：花椰菜花叶病毒(CaMV)的35S启动、水稻肌动蛋白Act1启动子、玉米泛素Ubi启动子等。虽然这些启动子能启动外源基因的高效表达，但是，外源基因的组成型表达往往造成能量的非必要浪费，同时，组成型表达外源基因还具有一定的潜在副作用，因此组织特异性启动子成为转基因研究的首选启动子。虽然叶片特异表达启动子研究的较多，但这些启动子我们都没有知识产权，因此构建有自己产权的叶片特异表达启动子显得尤其重要。 PNZIP基因是我们从裂叶牵牛中分离出来的一种叶片特异表达基因，它的表达具有很高的叶片转一性。因此，我们利用接头PCR技术克隆了PNZIP基因的启动子。该启动子长度约为1400bp，基因银行注册号为：AF373414，具有真核生物启动子的经典特征。 我们根据PNZIP基因启动子的序列特征，利用PCR技术对该启动子进行了有目的的缺失，缺失产物依次为1096 bp，675 bp，489 bp，143 bp。然后将PNZIP基因全长启动子及其缺失片段替换pB1121中的35S启动子，得到了5个与GUS报告基因融合的植物表达载体，并转化烟草。通过对转基因烟草GUS活性的组织化学分析和定量测定，结果如下：1．PNZIP基因启动子是一个具有严格叶片专一性的启动子，在GUS组织化学分析中，含有PNZIP基因启动子的烟草叶片均变蓝，而根部则不变蓝。2．PNZIP基因启动子是一个活性很高的启动子，全长启动子在叶片的启动活性是35S启动子在叶片启动活性的9倍。3．PNZIP基因启动子也是一个光诱导的启动子，它含有光诱导有关的元件，如：G-box，GT-Ⅱ box，类A／T-box。4．PNZIP基因启动子中存在着2个与叶片特异表达有关的新的顺式作用元件，即GAAATA，GATAC。在全长启动子中GAAATA元件有6个，GAATAC元件有4个。其中GAATAC元件可能决定基因的叶片特异性表达，而GAAATA可能是一个增强子，它能增强基因在叶片的表达强度。5．位置效应与多拷贝整合影响外源基因的表达水平。