安泰口服液对荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuhaoxin1987
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目的:本实验研究拟观察安泰口服液对荷瘤小鼠免疫相关细胞因子影响,初步探讨其免疫作用机制。材料与方法:1材料:健康BALBI/C小鼠,雌雄各半、体重18-22g、S180瘤珠、H22瘤株,环磷酰胺、肝素钠注射液、全自动酶标仪、BC3000全自动血液细胞分析仪、MODELDS-671型号电子秤、小鼠白介素-2ELISA试剂盒,小鼠白介素-4ELISA试剂盒,小鼠INF-γ ELISA试剂盒。药物:安泰口服液:骨脂薏苡仁白扁豆芍药炙甘草黄芪半枝莲等,贞芪扶正颗粒。2方法:2.1造模:2.1.1肿瘤模型的建立:将已接种7天精神状态良好、腹水饱满的腹水瘤小鼠抽吸腹水,用生理盐水按适当的比例进行稀释,计数肿瘤细胞数目,并调整细胞数为1×107个/ml。瘤株接种前,均用0.2%台盼蓝染色,计数活细胞率>95%。在小鼠右前腋下皮下注射0.2mlS180细胞悬液(约2×106个细胞),制成实体瘤模型。除了空白组外其余组均予以造模,共计造模40只小鼠,雌雄各半,均于造模后24h起开始灌胃,连续给药10天,其中实验各组给予相应药物,模型对照组和对照组给予相等剂量的0.9%生理盐水。2.2动物分组:BALBI/C小鼠随机分成5组,每组10只,雌雄各半。分别为:空白对照组、模型对照组、贞芪扶正颗粒组、安泰口服液低剂量组、安泰口服液高剂量组。除空白对照组,其余4组均为荷瘤小鼠。2.3动物给药:荷瘤小鼠各组腹腔每日注射环磷酰胺20mg/kg,实验各组灌胃给药0.4ml/次(相当安泰口服液低剂量组方药生药1.13g,安泰口服液高剂量组方药生药3.39g,贞芪扶正颗粒组给药量为0.1g),1次/日。模型对照组和空白对照组给予相等剂量的0.9%生理盐水。为保证给药量不对小鼠胃部造成损伤,灌胃给药前禁食及禁水2小时,安泰口服液和贞芪扶正颗粒组均给予加热。2.4观察指标:每天观察各组小鼠的毛发、活动度、饮食、二便及死亡情况,分别在实验第1天和实验10天给药结束24小时后测量各组小鼠体重,观察小鼠用药前后体重的变化,实验第10天给药结束24小时后,采用小鼠眼球摘除法采集血液标本,用装有肝素钠的离心管收集血液,采用ELISA法检测小鼠外周血IL-2、IL-4、IFN-γ的含量。随后迅速处死各组小鼠,剥离肿瘤称取其重量。2.5安泰口服液对S180荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验:荷瘤小鼠各组腹腔每日注射环磷酰胺20mg/kg,实验各组灌胃给药连续10天。末次给药后24h,从小鼠内眦静脉丛采集血液标本,检测外周血液中IL-2、IL-4、INF-γ水平。2.6安泰口服液对H22荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验:荷瘤小鼠各组腹腔每日注射环磷酰胺20mg/kg,实验各组灌胃给药连续10天。末次给药后24h,从小鼠内眦静脉丛采集血液标本,检测外周血液中IL-2、IL-4、INF-γ水平。结果:1.由安泰口服液对S180荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验可见,用药后,安泰口服液高剂量组、安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量与模型对照组比较差异明显(P<0.05),均能显著的增加荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的含量,提高小鼠免疫力,使荷瘤小鼠的免疫细胞因子的水平明显增加。安泰口服液高剂量组荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量高于安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组。由此可见安泰口服液组能显著的增加荷瘤小鼠血清中免疫相关细胞因子的水平。1.1通过本实验进一步验证了安泰口服液具有抑制肿瘤生长的作用,安泰口服液高剂量组荷瘤小鼠肿瘤质量小于安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组。而实验中对各组小鼠一般状况的观察,用药后安泰口服液组体重与模型对照组体重的比较明显增加,用药前后体重变化安泰口服液组与模型组也存在明显差异,结合每天对小鼠毛发、活动度、饮食、二便及死亡情况的观察,模型组在试验过程中存在死亡,而存活小鼠的毛发质量差,活动、饮食、二便均较其余组小鼠减少。2.由安泰口服液对H22荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验可见,用药后,安泰口服液低剂量组、安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量与模型对照组比较差异明显(P<0.05),均能显著的增加荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的含量,提高小鼠免疫力,使荷瘤小鼠的免疫细胞因子的水平明显增加。安泰口服液高剂量组荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量高于安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组。由此可见安泰口服液组能显著的增加荷瘤小鼠血清中免疫相关细胞因子的水平。2.1通过本实验进一步验证了安泰口服液具有抑制肿瘤生长的作用,安泰口服液高剂量组荷瘤小鼠肿瘤质量小于安泰口服液高剂量组、贞芪扶正颗粒组。而实验中对各组小鼠一般状况的观察,用药后安泰口服液组体重与模型对照组体重的比较明显增加,用药前后体重变化安泰口服液组与模型组也存在明显差异,结合每天对小鼠毛发、活动度、饮食、二便及死亡情况的观察,模型组在试验过程中存在死亡,而存活小鼠的毛发质量差,活动、饮食、二便均较其余组小鼠减少。结论本研究通过观察安泰口服液对荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验结果得出以下结论:1由安泰口服液对荷瘤小鼠免疫相关细胞因子的影响的实验可见:安泰口服液低剂量组和高剂量组均能显著提高荷瘤小鼠的免疫细胞因子水平,作用均优于贞芪扶正颗粒组,并且随着安泰口服液剂量的加大,其升高免疫相关细胞因子的作用亦随之上升。2通过本实验进一步验证了安泰口服液具有抑制肿瘤生长的作用。而实验中对各组小鼠一般状况的观察,用药后安泰口服液组体重与模型对照组体重的比较明显增加,用药前后体重变化安泰口服液组与模型组也存在明显差异,结合每天对小鼠毛发、活动度、饮食、二便及死亡情况的观察,模型组在试验过程中存在死亡,而存活小鼠的毛发质量差,活动、饮食、二便均较其余组小鼠减少。综上可知,安泰口服液具有增加免疫相关细胞因子的作用,随着安泰口服液剂量的加大,其升高免疫相关细胞因子的作用亦随之上升,而由用药后对小鼠一般状况的观察安泰口服液低、高剂量组之间无明显差异,可见安泰口服液具有一定的安全性。肿瘤免疫相关细胞因子是由CD4+T淋巴细胞为主的多种参与细胞免疫的机体细胞分泌的细胞因子,而由免疫相关细胞因子的增加可以推出细胞免疫被相应的加强,而通过本实验可知:安泰口服液具有提高机体免疫相关细胞因子水平,进而促进细胞免疫的应答,由此可以推出安泰口服液对低下的细胞免疫功能具有恢复作用。
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