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目的:研究甘草查尔酮B(LCB)对MCF-7细胞周期及凋亡的影响,并进一步探讨甘草查尔酮B诱导MCF-7细胞凋亡的相关机制。方法:磺酰罗丹明B(SRB)法测定不同浓度下LCB抑制MCF-7细胞增殖的作用;Hoechst33258荧光染色法观察LCB所导致细胞凋亡的形态;通过流式细胞技术测定MCF-7细胞凋亡率及LCB对细胞周期的影响;用活性氧检测试剂盒测定MCF-7内总活性氧(ROS)的变化;流式细胞技术结合线粒体膜电位检测试剂盒测量LCB对线粒体的膜电位的影响;RT-qPCR方法测定cyclinA、CDK2、CDC25A、Caspase-9、Bcl-2、Bax、Caspase3的转录水平变化;运用蛋白质免疫印迹实验(Western blot)法测定凋亡相关蛋白 Caspase-9、Bcl-2、Bax、Caspase 3、cytochrome C、P53以及周期相关蛋白cyclinA、CDK2、CDC25A、P21mRNA的变化。结果:LCB可以明显控制MCF-7细胞增殖,并伴着浓度、时间的增长而升高。经甘草查尔酮B处理后的MCF-7细胞出现明显的形态上的改变,呈现出典型凋亡形态学特征例如染色体边集、核浓缩、核碎裂等。细胞凋亡率的增长与浓度的上升成正百分比趋势。另外,MCF-7细胞经过LCB处理24h后,S期的细胞百分比上升,G2/M期百分比逐一减少,表明周期停滞在S期;细胞周期密切联系的cyclinA,Cdk2和Cdc25A的mRNA水平和蛋白表达程度均被下调,p21蛋白水平增加。MCF-7内总活性氧(ROS)程度跟随时间及药物浓度的增进而增长。随LCB浓度增长导致线粒体膜电势依次递减,细胞色素C的释出增多。而且LCB可以上调P53、Caspase-3,Caspase-9和Bax的mRNA水平和蛋白质水平,下调Bcl-2转录和蛋白水平,从而导致MCF-7细胞凋亡。结论:研究表明LCB可以通过细胞周期停滞和线粒体凋亡通路引起MCF-7细胞凋亡,从而抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖。LCB处理MCF-7细胞后可激活p53及其下游效应物p21,然后诱导S期停滞。此外,p53和p21的活化也可以诱导细胞色素c从线粒体释出到细胞质,然后就会引起caspase-9和caspase-3的活化和Bcl-2的下调。本研究为甘草查尔酮B抗癌的活性提供了证据,揭示了甘草查尔酮B抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的可能机制。