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本试验研究的主要内容是探讨不同的添加物及培养系统对水牛早期胚胎体外发育的影响，通过这些影响胚胎体外发育的重要因素的研究，确定合适的添加浓度，为不断改善牛早期胚胎培养液组分及培养系统提供科学的依据。抽取来自屠宰场水牛卵巢表面直径为2～6mm卵泡的卵母细胞，在体外成熟培养后与水牛精子进行体外受精(IVF)，受精后18h将假定受精的卵子移入添加有不同成分的培养系统进行培养，受精后2d检查分裂率，5～9d检查囊胚发育率；所得囊胚分别进行冷冻，观察其解冻后囊胚的孵化能力；用Hoechst33342进行染色，检查其细胞数；进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，进行胚胎蛋白质组分差异分析。结果发现：1)在TCM-199培养液中添加的胰岛素浓度为5μg／mL时，水牛早期胚胎的囊胚发育率，囊胚细胞数及冷冻—解冻后胚胎的孵化率都显著高于对照组及其他浓度组(P＜0.05)；2)不管在受精后18h还是96h在TCM-199培养液中加入葡萄糖，当浓度大于6mM时显著影响水牛早期胚胎发育到囊胚及孵化囊胚的阶段(P＜0.05)；3)在TCM-199培养液中联合添加胰岛素和葡萄糖时能显著提高水牛早期胚胎的孵化囊胚率、总囊胚率和囊胚细胞数(P＜0.05)，且对胚胎蛋白质组表达没有影响；4)受精后在TCM-199t音养液中加入非必需氨基酸和96h后添加必需氨基酸能显著提高水牛胚胎的发育能力(P＜0.05)，不影响胚胎蛋白质组分的表达；5)在TCM-199培养液中添加肌醇及柠檬酸钠对水牛胚胎的发育无显著差异(P＞0.05)，对胚胎蛋白质组分的表达没有影响；6)水牛胚胎分别在以颗粒细胞和输卵管上皮细胞为共培养系统中培养时，其囊胚发育率，囊胚细胞数及冷冻—解冻后胚