法氏囊(bursa of Fabricius,BF)是鸟类特有的免疫器官,它是B淋巴细胞发育、分化和成熟的场所,发育成熟的B淋巴细胞从法氏囊迁移到外周淋巴器官中进行定居、繁衍,并执行重要的免疫功能。幼龄鸡法氏囊易受感染而受损,甚至发生萎缩,引起免疫抑制,给养鸡生产带来巨大经济损失。因此,研究鸡法氏囊发育的调控机理,对疾病的预防和诊断具有非常重要的现实意义。本课题拟对不同日龄鸡法氏囊形态结构、法氏囊内多糖物质、肥大细胞和Toll样受体4(Toll like receptor4, TLR4)的变化规律进行研究,从形态学角度探讨鸡法氏囊发育规律,主要研究内容和结果如下：1鸡法氏囊形态结构发育变化规律本课题采用HE染色技术对不同日龄鸡法氏囊的形态结构进行了研究,结果显示：随着日龄的增长,法氏囊不断完善自身结构,细胞排列更加紧密,淋巴滤泡逐渐增大,淋巴细胞增多,1日龄法氏囊形成约4-5条细长的黏膜皱襞,黏膜下层较薄,呈疏松的空网状；肌层内平滑肌细胞数量较少,浆膜较薄；7日龄法氏囊淋巴结内皮质髓质分界清晰,滤泡数量显著增大增多；21日龄到35日龄,滤泡由多边形逐渐转变成长方形；在42日龄时,黏膜上皮细胞逐渐增多,排列紧密,细胞核紧密排列成直线位于上皮基底部。这一研究表明,随着日龄的增长鸡法氏囊逐渐发育完善。2鸡法氏囊内多糖物质发育变化规律本课题采用PAS染色技术对不同日龄鸡法氏囊内多糖物质的变化规律进行了研究,结果显示：多糖物质在法氏囊中存在大量表达,且主要分布黏膜层的上皮和固有层中,皮质和髓质都很少分布,随着日龄的增长,法氏囊黏膜层阳性细胞更加明显,上皮和固有层多糖物质更多,淋巴小结含量较少,数据统计结果表明,与其它日龄相比,多糖物质的面积以及积分光密度值在42日龄时差异显著(P<0.05),这一研究表明,经PAS染色后,法氏囊的黏膜层中含有较多的多糖物质,可能黏膜层与外界接触较多,相应淋巴细胞的代谢、生长和增殖较快,有利于抵御外界病原微生物。3鸡法氏囊内肥大细胞发育变化规律本课题采用甲苯胺蓝染色技术对不同日龄鸡法氏囊内肥大细胞的变化规律进行了研究,结果显示；肥大细胞在法氏囊中有大量表达,且主要分布于黏膜上皮及淋巴滤泡周围的结缔组织中,随着日龄的增长,在黏膜层的表达量随日龄增加有逐渐增强的趋势,而在固有层及黏膜下层则有先增加后减少的趋势。21日龄后,肥大细胞则集中表达于黏膜层中,皮、髓质一般无肥大细胞分布。数据统计结果表明,与其它日龄相比,肥大细胞数量、面积以及光密度值在42日龄时差异显著(P<0.05),这一研究表明：法氏囊的肥大细胞大多分布于法氏囊浅层的黏膜上皮下方、固有层等与抗原易接触的部位,而黏膜下层的结缔组织中肥大细胞很少,肌层和浆膜少有分布。4鸡法氏囊内TLR4发育变化规律本课题采用免疫组织化学染色技术对不同日龄鸡法氏囊内TLR4的变化规律进行了研究,结果显示：TLR4在整个法氏囊内都有表达,主要分布于黏膜层和黏膜下层,尤其是黏膜下层的淋巴小结,随着日龄的增长,TLR4在囊内的表达有先升高后下降的趋势,基本上是在1到35天TLR4的表达量随日龄增加而上升,而在42日龄时表达量有显著下降的趋势。数据统计结果表明,与其它日龄相比,TLR4阳性细胞数量以及积分光密度值在35日龄时差异最显著(P<0.05),这一研究表明,免疫因子TLR4在不同日龄的法氏囊中表现出一定的规律性,其表达强度也与法氏囊的发育呈现一定的时间相关性,提示天然免疫因子TLR4在法氏囊的前期生长发育中起到了非常重要的作用。