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应激现已成为影响现代化养猪业母猪繁殖性能的重要因素之一。大量生产实践以及实验研究表明,应激能够引起雌性家畜生殖系统紊乱并造成繁殖障碍。因此本研究采用注射外源ACTH的方式模拟应激,以探究应激对断奶母猪卵巢不同结构(卵泡和黄体)的发育及其功能的影响,为应对应激造成的繁殖障碍提供一定的理论基础。试验选用健康经产苏怀母猪14头,母猪带仔40天时断奶,行颈静脉插管手术后,随机将受试母猪均分成对照组和ACTH应激处理组。自手术后第2天,对处理组母猪使用静脉注射的方式注射ACTH,1I.U/kg,每日3次,连续注射七天,对照组母猪则注射相同体积的生理盐水。所有受试母猪自第2天开始,每天从其颈静脉插管中定时抽取血液并分离血浆,用以测定激素等指标。实验至第五天时,自每组受试母猪中随机选取2头进行屠宰,分离卵巢组织,现场统计卵巢组织发育情况并拍照,取部分卵巢组织固定于10%中性福尔马林溶液中固定,其余部分组织于-80℃保存备用。母猪发情后第四天宰杀剩余所有受试母猪,分离卵巢组织,现场统计卵巢组织发育情况并拍照,取部分卵巢组织固定于10%中性福尔马林溶液中固定,其余组织于-80℃保存。本试验采用ELISA方法检测母猪血浆中皮质醇的含量;背部按压反射结合阴道检查确定母猪发情情况;统计第5天与第9天收集的卵巢中卵泡或黄体的数量与直径;荧光定量PCR检测卵泡壁中MMPs、TIMPs、LHR、VEGFa以及黄体中MMPs、TIMPs、VEGFa、stAR、3β-HSD、P450scc的基因表达情况;明胶酶谱法检测卵泡壁和黄体中MMP-2和MMP-9的活性;蛋白质免疫印记试验半定量分析卵泡壁中LHR、VEGFa以及黄体中VEGFa、stAR、3β-HSD、P450scc的蛋白含量;Masson染色显示卵泡壁中胶原含量;组织学及免疫组织化学检测以显示黄体组织的形态学、血管新生密度和3β-HSD的表达强度等。研究结果显示,注射外源性ACTH造成母猪血浆中皮质醇含量显著高于空白对照组受试母猪;ACTH应激处理组受试母猪发情时间明显推迟约24h;ACTH应激处理造成第9天时5例受试母猪中的有2例出现不排卵,使得ACTH应激组受试母猪的总体排卵率仅为60%,而空白对照组母猪则全部正常排卵形成黄体;ACTH应激处理造成受试母猪中有1例出现单侧卵巢脓肿;与对照组相比,ACTH应激处理组受试母猪排卵前卵泡壁中LHR与VEGFa的基因表达和蛋白水平明显下调;ACTH处理组卵泡壁以及新生黄体内的MMP-2、MMP-9的基因表达明显下调且MMP-9的活性明显降低;应激处理组受试母猪卵泡壁中胶原比例明显高于对照组;与对照组相比,应激处理受试组母猪黄体内P450scc,3β-HSD的表达量明显下降,并且3β-HSD免疫组化显示,受试母猪黄体内的阳性细胞率及信号强度均低于空白对照组;ACTH应激处理组受试母猪新生黄体内MMP-2和MMP-9的基因表达和以及MMP-9的酶活性均明显下降;应激处理组受试母猪黄体组织中VEGFa的表达水平和血管新生密度均低于对照组。以上结果表明,注射外源ACTH模拟应激可造成断奶母猪血浆中皮质醇含量显著升高;可延迟母猪发情;在卵泡期,通过直接或是间接的方式抑制母猪卵巢内MMPs表达和活性抑制排卵;黄体期早期阶段,抑制母猪卵巢内MMPs和VEGF的表达和活性以及多种孕酮合成酶的表达,可抑制新生黄体的发育和血管新生以及孕酮合成能力。