阿尔茨海默症,是一种严重危害人体健康的慢性神经退化性疾病。其神经病理学变化主要以神经元发生病理变化为主,如神经元丢失导致的神经纤维结节、β淀粉样蛋白和各种新陈代谢失调的功能性缺失等,同时带来不可逆性的神经突触功能障碍和神经退行性变化,最后造成患者智力和器官功能衰退直至死亡。由于阿尔茨海默症病理变化的多面性,以及对它疾病机理的认识远远不足,现有的国内外医学手段很难治愈此病。其中关键点在于,没有一个可以很好模仿阿尔茨海默症患者病理特点的动物模型。尤其是由基因突变所致的、自发的、与人类相似的非人灵长类阿尔茨海默症模型。根据文献研究报道,淀粉样前体蛋白基因翻译形成的蛋白多量积累,是诱导阿尔茨海默症成因的重要因素。APP基因的第16和17外显子过量表达可能会诱导患者出现阿尔茨海默症特征性病理样变(又称为APP695),神经元周围出现淀粉样沉淀。本论文实验方法为,首先对淀粉样前体蛋白基因第16和17外显子的确立过表达基因序列。筛选并构建灵长类神经元特异性启动子Syn为启动子,GFP为标记分子的过表达淀粉样前体蛋白基因的特殊序列的载体PGMLV质粒,在293T细胞中包装出相应的APP慢病毒载体。通过QPCR测定慢病毒滴度。将得到的APP慢病毒载体感染SH-SY5Y细胞,猴成纤维细胞,293T细胞,分别在感染24h和48h后通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。其中,只有SH-SY5Y细胞成功被感染,并且有绿色荧光蛋白表达。下一步使用流式细胞仪来检测慢病毒感染效率。其次针对过表达APP是否造成细胞毒性进行进一步检测,使用CCK-8法来检测细胞活性。最后,利用APP慢病毒载体感染食蟹猴胚胎,检测基因整合情况,并进行胚胎移植实验。实验结果表明,本研究成功构建了可在食蟹猴的神经细胞中进行特异性过表达的APP695基因的慢病毒载体。经过实验验证,本慢病毒载体具有良好的食蟹猴神经细胞特异性。相对于慢病毒空载体组,转染过表达APP695基因的神经细胞更容易造成细胞衰亡。APP695基因的慢病毒载体也成功嵌入感染食蟹猴胚胎,相应的胚胎进行了3例胚胎移植。其中怀孕1只。上述APP载体体系将为建立合适的阿尔茨海默症动物模型提供些许思路和研究方法。