人脂肪干细胞来源细胞外囊泡对华勒氏变性早期雪旺细胞影响的研究

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背景:近年来研究表明人脂肪来源干细胞细胞外囊泡(Human adipose-derived stem cell extracellular vesicle,hADSC-EVs)在组织修复再生方面有广阔的应用前景。作为组织再生的新型非细胞疗法,EVs能很大程度避免了移植并发症风险而同时能够发挥干细胞相同的治疗效果。本研究采用体外华勒氏变性模型,评估hADSCs-EVs对雪旺细胞的影响,重点关注华勒变性早期hADSCs-EVs对雪旺细胞去分化、增殖及凋亡影响,并研究探讨相关的作用机制。方法:实验主要分为两大部分(1)对分离培养的脂肪干细胞,及从中提取的细胞外囊泡进行特性鉴定。(2)制备大鼠华勒变性体外模型,并给予不同浓度(0ug/ml、50ug/ml、和100ug/ml)hADSCs-EVs干预不同时长(12h、24h),收集模型组织后通过免疫荧光染色、蛋白印迹法和Real time PCR评估经干预的雪旺细胞去分化情况;不同浓度(0ug/ml和100ug/ml)干预模型24h后,免疫荧光染色、Real time PCR检测雪旺细胞增殖情况;Tunel染色法、Western Blot检测凋亡情况;不同浓度(0ug/ml、50ug/ml、和100ug/ml)hADSCs-EVs干预不同时长(12h、24h),收集模型培养液后通过Elisa测定雪旺细胞分泌的细胞因子的表达情况。结果:成功分离培养了ADSCs,并鉴定其提取物符合细胞外囊泡标准。hADSC-EVs可促进华勒氏变性早期的雪旺细胞去分化,并促进SCs的增殖且抑制其凋亡。hADSC-EVs还促进华勒氏变性早期SCs分泌多种神经营养因子。结论:hADSC-EVs通过促进华勒氏变性过程中雪旺细胞去分化,促进其增殖且抑制其凋亡,同时促进其分泌多种神经营养因子,进而形成有利神经再生的微环境。
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