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目的通过对慢性重型乙肝患者外周血单个核细胞TLR2和TLR9的表达研究,探讨TLR2和TLR9在慢性重型乙肝发病机制中的作用及与病情严重程度的关系。方法采集湘雅医院2010年3月至2011年2月慢性重型乙肝住院患者45例(实验组)和健康志愿者23例(对照组)的肝素抗凝血和促凝血。肝素抗凝血分离外周血单个核细胞,用流式细胞仪检测TLR2和TLR9蛋白在淋巴细胞和单核细胞上的表达水平,用荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2和TLR9 mRNA的相对表达水平。促凝血分离血清,用ELISA方法检测血清TNF-α的浓度。结果1.流式检测结果：(1)实验组和对照组单核细胞TLR2蛋白表达阳性率(%)分别为92.11±16.43和81.84±29.80,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR2蛋白表达阳性率(%)分别为9.73+5.37和2.18±2.46,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组单核细胞TLR2蛋白荧光强度分别为149.82+43.93和170.25±76.43,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR2蛋白荧光强度分别为6.04±5.21和4.26+2.46,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)实验组和对照组单核细胞TLR9蛋白表达阳性率(%)分别为81.65±32.31和55.03±21.60,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR9蛋白表达阳性率(%)分别为75.64+37.15和23.29±18.87,差异有统计学意义(P<0.05)；实验组和对照组单核细胞TLR9蛋白荧光强度分别为140.614±48.35和225.85±90.11,差异有统计学意义(P<0.05)；实验组和对照组淋巴细胞TLR9蛋白荧光强度分别为37.39±18.36和19.51±11.13,差异有统计学意义(P<0.05)。2.外周血单个核细胞TLR2和TLR9 mRNA的检测结果：实验组和对照组TLR2 mRNA的相对表达量分别为0.209±0.226和0.356+0.310,差异无统计学意义(P>0.05)；实验组和对照组TLR9 mRNA的相对表达量分别为0.014+0.028和0.253±0.159,差异有统计学意义(P<0.05)。3.实验组和对照组血清TNF-α水平(pg/m1)分别为260.15+71.35和158.66±99.23,差异有统计学意义(P<0.05)。4.与临床资料的相关性分析：单核细胞TLR9蛋白荧光强度和HBeAg呈正相关(r=0.382,P<0.05)；TLR9 mRNA的相对表达量和PTA呈正相关(r=0.313,P<0.05)；TNF-α和PTA呈负相关(r=-0.372, P<0.05); TLR9 mRNA的相对表达量和单核细胞TLR9蛋白荧光强度呈正相关(r=0.459,P<0.01)。结论(1)TLR2主要表达在单核细胞上,淋巴细胞上表达很弱。TLR9在单核细胞和淋巴细胞上均有一定比例的表达。(2)TLR9表达降低与慢性重型乙肝的发病机理有关。(3)TLR9与慢性重型乙肝的病情严重程度呈负相关。TNF-α与慢性重型乙肝的病情严重程度呈正相关。