目的1.探索并独立设计一种安全、有效、温度稳定的眼库角膜包装系统,可以用于中期保存角膜及长期甘油冷冻保存角膜的远程投送。2.研究此包装系统运用于中期保存角膜远程投送的温度时间变化曲线及有效温度(0～4℃)的维持时间,探讨该包装应用于中期保存角膜供体材料远程投送的安全性和可行性。3.研究运用此包装系统进行甘油冷冻保存角膜远程投送的温度时间变化曲线及有效温度(≤-20℃)的维持时间,探讨该包装系统应用于甘油冷冻保存角膜供体材料远程投送的安全性和可行性。4.使用本包装系统模拟远程投送中期保存兔角膜后,进行穿透性角膜移植(PKP),研究远程投送对中期保存角膜移植及内皮细胞(CEC)活性的影响。5.使用本包装系统模拟远程投送甘油冷冻保存角膜后,进行穿透性角膜移植(PKP),研究远程投送对甘油冷冻保存角膜移植的影响。方法1.常温下,将冰点为4℃冰盒与盛有4℃中期保存液的保存瓶,一同置于保温箱内,并用海绵填充固定。按照保存介质(中期保存液)体积分组,采用双通道温度记录仪,记录不同组别的瓶内瓶外温度变化曲线,观察该包装能否满足中期保存>0℃,≤4℃的温度要求,及该温度范围的维持时间。对照组为普通冰桶,测定相应温度指标,并在各分组间进行两两比较分析。2.常温下,将冰点为-21℃的冰盒与盛有-25℃冷冻甘油的保存瓶,一同置于保温箱内,并用海绵填充箱体。实验组按照保存介质(冷冻甘油)体积分组,采用双通道温度记录仪,记录不同组别的瓶内瓶外温度变化曲线,观察该包装能否满足甘油冷冻保存-20℃以下的温度要求,及该温度范围的维持时间,对照组为普通冰桶,测定相应温度指标,并在各分组间进行两两比较分析。3.模拟远程投送兔角膜后行PKP术,实验组取中期保存7d后8只兔角膜,按照一定频率及时间的振动作用模拟远程投送,然后均行PKP术以及钻切剩余角膜锥蓝-茜素红CEC活性染色检查。对照组取中期保存7d后8只兔角膜直接行PKP术及活性染色检查。术后不同时间对所有实验动物进行大体观察、裂隙灯检查、A超角膜测厚。术后30d处死后,对植片CEC进行台盼兰茜素红联合染色检查。4.模拟远程投送兔角膜后行PKP术,实验组取甘油冷冻保存4月后8只兔角膜,按照一定频率及时间的振动作用模拟远程投送,然后均行PKP术。对照组取甘油冷冻保存4月后8只兔角膜直接行PKP术。术后不同时间对所有实验动物进行大体观察、裂隙灯检查、A超角膜测厚。术后30d处死后,对植片CEC进行台盼兰茜素红联合染色检查。结果1.常温下,保存介质在一定体积范围内,该远程投送系统可维持>0℃,≤4℃达20小时,温度无剧烈波动,明显长于普通冰桶相关指标,差异有显著性。模拟远程投送前后角膜植片在本包装系统运输保存瓶中的固定情况良好。2.常温下,实验各组保存介质冷冻甘油24小时温度几何均数均低于-20℃,而对照组24小时温度均高于-17℃。保存介质体积≤300ml可以维持温度-20℃以下达20小时以上,各实验组与对照组比较,差异有显著性。3.中期保存兔角膜模拟远程投送,实验组与对照组钻切剩余角膜CEC活性染色检查、角膜移植术后角膜厚度、水肿消退时间及术后30d植片CEC染色等指标无统计学差异。4.长期甘油冷冻保存兔角膜模拟远程投送,实验组与对照组角膜移植术后角膜厚度、水肿消退时间及术后30d植片CEC染色等指标比较无显著性差异。结论1.常温条件下,该包装系统能有效控制温度满足中期保存角膜的温度要求和国内国际大部分地区投送的时间要求;并且本包装系统具有防震及保持植片固定特点,应用于中期保存角膜安全可靠,进行远程投送具有可行性。2.常温条件下,该包装系统能有效控制温度于-20℃以下,可以满足长期甘油冷冻保存角膜的温度要求;可维持该温度范围达20小时以上,可以满足运用现有交通工具进行国内国际大部分地区远程投送的时间要求。3.采用本包装系统模拟远程投送后对CEC活性无明显影响,进行角膜移植效果确切。该包装系统可以作为野战眼库(field eye bank,FEB)构建的重要组成部分,满足平战时远程转运中期保存角膜的需要。4.采用本包装系统模拟远程投送后对甘油冷冻保存兔角膜行穿透性角膜移植效果确切,该包装系统可以作为FEB构建的重要组成部分,满足平战时远程转运长期甘油冷冻保存角膜的需要。