论文部分内容阅读
目的:探讨温阳散寒、补气养血法治疗恶性肿瘤的作用机理,并观察其治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效。方法:(1)抗肿瘤作用。复制小鼠S180肉瘤和EAC模型,观察温阳散寒、补气养血法组方的抑瘤和延长荷EAC小鼠生存期的作用。(2)对树突状细胞(DC)数量及成熟的影响。复制小鼠艾氏腹水癌(EAC)模型,分组给药,抽取腹水,分离单个核细胞,流式细胞仪器检测CD11c、CD80阳性率及两者双阳性率;取小鼠骨髓细胞,加入含中药及重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)培养液,不同时间点观察培养细胞形态,流式细胞仪检测培养细胞CD11c、CD80阳性率及两者双阳性率;取治疗前后非小细胞肺癌患者外周血,流式细胞仪检测外周血髓系DC数量及与单核细胞比值。(3)对相关细胞因子的影响。采用ELISA方法,测定中药干预后小鼠艾氏腹水癌中IL-12、IL-4、IFN-γ变化;测定含中药体外诱导DC培养液中IL-12水平。(4)对DC介导的细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性影响。收集合中药培养液诱导的小鼠髓源性DC,与小鼠脾脏分离、培养的T淋巴细胞以1:50比例共同培养3天,分离EAC小鼠腹水中肿瘤细胞,效靶比为20:1与DC、T淋巴细胞共同孵育,MTT法测T细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。(5)对照观察温阳散寒、补气养血法配合化疗与单纯化疗治疗NSCLC患者的临床疗效。结果:(1)大、小剂量温阳散寒、补气养血法组方组抑瘤率分别为47.22%、45.78%,生命延长率分别为46.56%、39.69%,较模型组比较差异有显著性(P＜0.01),其中大剂量组生存期为(19.20±1.55)天,较化疗组差异有显著性(P＜0.05)。(2)大、小剂量中药组EAC小鼠腹水单个核细胞CD11c阳性率、CD80阳性率、CD11cCD80双阳性率均较模型组及化疗组高,差异有显著性(P＜0.05)。含药培养液体外诱导骨髓细胞CD11c阳性率、CD80阳性率、CD11cCD80双阳性率较空白对照组高,差异有显著性(P＜0.05)。(3)大、小剂量中药组小鼠腹水中IL-12、IFN-γ水平均较化疗组、模型组高,差异有显著性(P＜0.01),IL-4较化疗组、模型组低,差异有显著性(P＜0.05)。含中药培养液体外诱导DC分泌IL-12含量较空白组比高,差异有显著性(P＜0.05)。(4)高、低浓度中药组DC介导的CTL杀伤活性均较空白组高,差异有显著性(P＜0.05)(5)中药与化疗合用治疗晚期NSCLC,2月后淋巴结转移率为4.8%,较单用化疗组小,差异有显著性(P＜0.05);中药组主症疗效及生活质量提高稳定率分别为76.2%、90.5%,较单用化疗组高,差异有显著性(P＜0.05)。结论:(1)温阳散寒、补气养血法能明显抑制S180肉瘤的生长,显著延长荷EAC小鼠的生存时间。(2)本法在体外和体内均能明显提高小鼠树突状细胞特异性表面抗原CD11c和共刺激分子CD80的表达,说明该法方能提高DC的数量及成熟比例。(3)本法能提高EAC小鼠腹水中IL-12、Th1类细胞因子IFN-γ水平,降低Th2类细胞因子IL-4水平,使免疫微环境中Th1/Th2向有利于肿瘤免疫的Th1方向漂移,提高肿瘤局部免疫功能。可能与该法提高DC的数量及成熟比例,增加IL-12分泌有关。(4)本法能提高体外诱导DC所介导的CTL杀伤肿瘤细胞活性。(5)本法与化疗合用治疗NSCLC,能降低淋巴结转移率,改善临床症状,提高生活质量。